Экспериментально-клиническое обоснование выбора стратегии профилактики гриппозной инфекции в период подготовки к пандемии (28.12.2009)

Автор: Миронов Александр Николаевич

V2 T T C T A A

21 сут V1 T T C T A A

V2 T T C T A A

Изучение локального иммунного ответа в носовых секретах волонтеров, привитых вакциной «Ультрагривак» показало, что достоверные приросты концентрации sIgA-антител в ИФА отмечены более чем в 2 раза, по сравнению с исходными значениями, после двукратного введения препарата, независимо от интервала введения 10 или 21 сут (рис. 7).

Рисунок 7 – Оценка местного иммунитета на введение вакцины «Ультрагривак»

При оценке в РМН сывороток крови привитых добровольцев после двукратной вакцинации процент лиц с титром антител ?1:20 составил более 70 %, с титром антител ?1:40 – более 50 %, при этом кратность прироста СГТ антител - 5 (рис. 8).

Рисунок 8 – Оценка иммуногенных свойств вакцины «Ультрагривак»

С целью оценки реактогенности, безопасности, местного, клеточного и гуморального иммунного ответа, выбора оптимальной схемы (интраназальная двукратная с интервалами 10 и 21 сут) вакцинации, а также возможности усиления иммуногенности препарата за счет увеличения дозы с 6,9 lg ЭИД50/0,5 мл до не менее 7,5 lg ЭИД50/0,5 мл на двух клинических базах с участием 200 добровольцев в возрасте от 18 до 60 лет была проведена II фаза клинических исследований вакцины «Ультрагривак».

Показано, что препарат вне зависимости от интервала введения 10 или 21 сут обладает хорошей переносимостью, безопасностью и низкой реактогенностью. Местные реакции были представлены катаральными явлениями в носоглотке, носили слабовыраженный транзиторный характер и исчезали через 1-2 суток (рис. 6). Уровни сывороточных иммуноглобулинов классов A, М, G и. Е, у всех добровольцев в течение периода исследования сохранялись в пределах нормальных значений. Получены положительные данные о выделяемости вируса из носовых ходов привитых, что свидетельствует о хорошей приживаемости вакцины. Для выделения вакцинного вируса потребовалось 2-3 пассажа на чувствительных культурах клеток, что говорит о крайне незначительном содержании вируса в мазках из полости носа привитых и может свидетельствовать о безопасности вакцины для окружающих (рис. 9).

Рисунок 9 – Оценка безопасности вакцины «Ультрагривак» для окружающих

Генетическая стабильность реизолятов вакцинного вируса продемонстрирована молекулярно-биологическими методами, что является существенной гарантией безопасности применения применяемого вакцинного штамма на людях. Полученные данные показывают, что вакцина «Ультрагривак» способна обеспечить иммунный ответ не только в отношении гомологичного вакцинного штамма А/17/утка/Потсдам/86/92 Н5N2 [17/Н5], и в отношении других штаммов вируса гриппа птиц А (H5N1): А/Vietnam/1194/2004 и A/Indonesia/5/2005, т.е. обладает высокой кросс-реактивностью (рис. 10). В результате проведенных клинических исследований установлено, что живая гриппозная вакцина «Ультрагривак

Рисунок 10 – Оценка кросс-реактивности вакцины «Ультрагривак»

ареактогенна, безвредна для вакцинируемых, безопасна для окружающих, индуцирует развитие местного, клеточного и гуморального иммунитета, что позволило зарегистрировать препарат в Российской Федерации с целью защиты населения в случае возникновения пандемии гриппа. Учитывая назначение вакцины «Ультрагривак» для специфической профилактики пандемического гриппа преимущество имеет схема введения препарата с интервалом 10 сут, что позволит сократить время для обеспечения полноценной защиты людей от инфекции.

Доклиническое и клиническое изучение инактивированных гриппозных вакцин «ОрниФлю», «ВГИПС» и «АвиФлю»

С целью оценки безопасности и эффективности полученных вакцинных кандидатов были проведены доклинические исследования на лабораторных животных. В результате проведенных исследований показано, что вакцины «ОрниФлю» и «ВГИПС» нетоксичны в остром и хроническом эксперименте, хорошо переносились животными, не обладали выраженными местными и местно-раздражающими действиями, не вызывали негативного влияния на патоморфологические, гистологические и гематологические показатели. Незначительные изменения изучаемых показателей более выражены были при использовании вакцины «ВГИПС». При изучении антигенных и протективных свойств показано, что для индукции иммунитета и получения эффективной защиты животных от патогенного вируса гриппа птиц необходимо проводить не менее двух иммунизаций. Наиболее оптимальной схемой иммунизации животных является внутримышечная двукратная с интервалом 28 сут в дозе 15 мкг НА, позволяющая инициировать выработку ИФ-АТ в титрах от 1:80 до 1:320, АГА – от 1:10 до 1:40 и ВНА – 1:20 и защищать от гибели от 50 до 80 % лабораторных животных, инфицированных вирулентным штаммом вируса птичьего гриппа А/курица/Курган/Россия/2/2005 (Н5N1) (табл. 4).

В рамках I фазы сравнительных клинических исследований на ограниченном контингенте добровольцев (241 доброволец в возрасте от 18 до 50 лет) с целью оценки реактогенности, безопасности и иммуногенности при использовании трех дозировок препаратов (15, 30 и 45 мкг НА) после одно- и двукратного введения были изучены инактивированные субъединичные сорбированная на алюминии гидроксиде «ОрниФлю» и в смеси с Полиоксидонием «ВГИПС» вакцины против гриппа птиц.

Оба типа вакцин отличались хорошей переносимостью, безопасностью и низкой реактогенностью. Серьезных побочных реакций на введение вакцинных препаратов отмечено не было ни в одном случае. В большинстве случаев местные реакции слабой и средней степени выраженности наблюдались как у привитых вакциной «ОрниФлю», так и вакциной «ВГИПС» и были представлены болью в месте введения вакцин (рис. 11, 12).

Уровень иммуногенности, индуцированный вакциной «ОрниФлю», содержащей 15 мкг НА соответствовал уровню иммуногенности индуцированному вакциной «ВГИПС», содержащей 45 мкг НА (рис. 13), а также по данным литературы показателям иммуногенности индуцированных препаратом субъединичной вакцины без адъюванта, содержащей 90 мкг НА и препаратом адсорбированной субъединичной вакцины, содержащей 30 мкг НА.

Исходя из концепции создания вакцинных препаратов, предпочтение отдается вакцине, которая при минимальном количестве антигена индуцирует достаточный уровень специфического иммунного ответа у привитых добровольцев и не оказывает неблагоприятного влияния на здоровье вакцинируемых.

Таблица 4 – Антигенные и протективные свойства инактивированных субъединичных вакцин «ОрниФлю» и «ВГИПС»

введения

вакцины Препарат Иммуни

щая доза, мкг НА

Величина титра антител в Количество погибших животных на …сутки после заражения Продолжительность жизни животных (х±?), сут. Доля выживших, процент

Одно-кратное

«ВГИПС» 1,0 <1:40 <1:10 <1:10

0 0 4 4 1 2 0 0 0 0 8,1±1,1 15,4 (2/13)

15,0 <1:40 <1:10 <1:10

0 0 6 5 0 1 0 0 0 0 7,7±0,9 20,0 (3/15)

«ОрниФлю» 1,0 <1:40 <1:10 <1:10

0 0 9 5 0 0 0 0 0 0 7,4±0,5 6,7 (1/15)

15,0 <1:80 <1:10 <1:10

0 0 7 2 0 0 0 0 0 0 7,2±0,4 40,0 (6/15)

Двукрат-ное

«ВГИПС» 1,0 1:40

1:10 1:10 0 0 3 7 0 0 0 0 0 0 7,7±0,5 28,6 (4/14)

15,0 1:80

1:20 1:20 0 0 4 2 1 0 0 0 0 0 7,6±0,8 50,0 (7/14)

«ОрниФлю» 1,0 1:40

<1:10 <1:10 0 0 6 7 1 0 0 0 0 0 7,6±0,6 6,7 (1/15)


загрузка...