Изучение регуляторных механизмов действия аналогов ГАМК на нейроиммунную систему (27.01.2012)

Автор: Самотруева Марина Александровна

- РГЗТ и РПГА Мусцимол, бикукуллин, пикротоксин, баклофен, факлофен, флюмазенил, натрия вальпроат, ГК, дизоциллин

2. Скрининг веществ с иммуномодулирующей активностью

РГЗТ и РПГА, масса тимуса и селезенки, количество тимоцитов и спленоцитов, лейкоцитарная формула 45 производных ГАМК (таблица 1)

3. Изучение зависимости «доза-иммуномодулирующее действие» «время-иммуномодулирующее действие»

РГЗТ и РПГА, фагоцитарная активность нейтрофилов в латексном тесте 1. «Доза-эффект» – фенибут, баклофен, фенотропил, ГК, РГПУ-29, РГПУ-147, РГПУ-189, РГПУ-195, РГПУ-138, РГПУ-216, РГПУ-135, РГПУ-186

2. «Время-эффект» – фенибут, баклофен, фенотропил, ГК, РГПУ-29, РГПУ-147, РГПУ-189, РГПУ-195, РГПУ-138, РГПУ-216, РГПУ-135, РГПУ-186 с профилактической (за 3 дня до индукции иммунодепрессии), терапевтической (через 3 дня после индукции иммунодепрессии) целью и одновременно с индукцией патологии

3. Курсовое введение – фенибут, баклофен, фенотропил, ГК, РГПУ-29, РГПУ-147, РГПУ-189, РГПУ-195, РГПУ-138, РГПУ-216, РГПУ-135, РГПУ-186

4. Изучение иммуномодулирующего действия производных ГАМК в условиях стрессогенного воздействия

ЛИС РГЗТ и РПГА, фагоцитарная активность нейтрофилов в латексном тесте, лейкоцитарная формула Фенибут, баклофен, фенотропил, ГК, РГПУ-29, РГПУ-147, РГПУ-189, РГПУ-195, РГПУ-138, РГПУ-216, РГПУ-135, РГПУ-186

Фенотропил и РГПУ-138

Фенотропил и РГПУ-138

Фенибут и РГПУ-147

5. Изучение психомодулирующего действия аналогов ГАМК в условиях стрессогенного воздействия

ЦИД «Открытое поле», «Приподнятый крестообразный лабиринт», «Вынужденное плавание» («Порсолт»), «Суок-тест» Фенибут, баклофен, фенотропил, ГК, РГПУ-29, РГПУ-147, РГПУ-189, РГПУ-195, РГПУ-138, РГПУ-216, РГПУ-135, РГПУ-186

Фенибут, баклофен, фенотропил, ГК, РГПУ-29, РГПУ-147, РГПУ-189, РГПУ-195, РГПУ-138, РГПУ-216, РГПУ-135, РГПУ-186

Фенотропил и РГПУ-138

Фенотропил и РГПУ-138

Фенибут и РГПУ-147

6. Изучение антиоксидантного действия аналогов ГАМК

ЦИД 1. Содержание МДА, церулоплазмина, активность каталазы в сыворотке крови.

2. Содержание МДА, скорости аскорбатзависимого и спонтанного ПОЛ, активность каталазы в гомогенате тимуса и селезенки

3. Содержание МДА, скорости аскорбатзависимого и спонтанного ПОЛ, активность каталазы в гомогенате гипоталамической области и префронтальной коры головного мозга Фенибут, баклофен, фенотропил, ГК, РГПУ-29, РГПУ-147, РГПУ-189, РГПУ-195, РГПУ-138, РГПУ-216, РГПУ-135, РГПУ-186

Фенибут, баклофен, фенотропил, ГК, РГПУ-29, РГПУ-147, РГПУ-189, РГПУ-195, РГПУ-138, РГПУ-216, РГПУ-135, РГПУ-186

Фенотропил и РГПУ-138

Фенотропил и РГПУ-138

Фенибут и РГПУ-147

7. Изучение возможных механизмов нейроиммуномодулирующего действия аналогов ГАМК

ЦИД Уровень плазменных ИЛ-1?, ИЛ-4 и ИЛ-6 Фенибут, фенотропил, РГПУ-138, РГПУ-147

Фенибут, фенотропил, РГПУ-138, РГПУ-147

Фенотропил и РГПУ-138

Фенибут и РГПУ-147

- РГЗТ и РПГА, масса тимуса и селезенки, количество тимоцитов и спленоцитов Фенотропил и РГПУ-138, фенибут и РГПУ-147 при взаимодействии с антагонистами рецепторов основных нейромедиаторов ЦНС in vivo

Интенсивность окислительно-восстановительных процессов иммунокомпетентных органов тимуса и селезенки, а также гипоталамической области и префронтальной коры головного мозга оценивали по ПОЛ (исходное, спонтанное и аскорбатзависимое) и активности каталазы в гомогенатах органов. Кроме того, интенсивность антиоксидантной защиты всего организма оценивали по уровню активности каталазы, содержанию МДА и церулоплазмина в сыворотке крови (Гончаренко М.С., 1985; Королюк М.А., 1988; Стальная И.Д., 1977; Тен Э.В., 1981).

Статистическую обработку результатов исследования осуществляли с помощью пакетов программ: Microsoft Office Excel 2007, BIOSTAT 2008 Professional 5.1.3.1, а также «БИОСТАТИКА». В зависимости от характера полученных результатов использовали параметрический метод с определением t-критерия Стьюдента с поправкой Бонферрони и Ньюмена-Кейлса для множественных сравнений, однофакторный дисперсионный анализ с определением критерия Тьюки-Крамера, критерия Шеффера, а также метод рангового однофакторного анализа Крускала-Уоллиса, критерий Данна для множественных сравнений.

РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

Изучение роли ГАМК-ергической системы в процессах нейроиммуномодуляции проводили с применением иммунофизиологического подхода с использованием веществ, являющихся агонистами или антагонистами ГАМК рецепторов или изменяющих ее метаболизм. Применяли анализаторы: мусцимол 2 мг/кг (Sigma, США) – селективный агонист ГАМКА рецепторов; бикукуллин 1,5 мг/кг (Fluka, Швейцария) – селективный антагонист ГАМКА рецепторов; пикротоксин 2 мг/кг (Sigma, США) – неконкурентный антагонист пресинаптических ГАМКА рецепторов, блокатор хлорных каналов ГАМКА-БД ионофорного комплекса; баклофен 10 мг/кг (LEIRAS, Финляндия) – агонист ГАМКВ рецепторов; факлофен 10 мг/кг (Sigma, США) – антагонист ГАМКВ рецепторов; флюмазенил 0,01 мг/кг (Hoffman La Roche Co, Швейцария) – антагонист БД сайта ГАМКА-БД ионофорного комплекса; натрия вальпроат 0,15 мг/кг ("SANOFI-AVENTIS", Франция) – ингибитор ГАМК-трансаминазы и активатор глутаматдекарбоксилазы; L-глутаминовая кислота 10 мг/кг (Sigma, США); дизоциллин 0,15 мг/кг (Sigma, США) – антагонист NMDA-рецепторов. Полученные результаты показали, что активация ГАМК-ергической системы, независимо от того, каким путем она достигнута: применением агонистов ГАМКА рецепторов, антагонистов ГАМКБ рецепторов или средств, повышающих концентрацию ГАМК в синаптическом пространстве – приводит к повышению иммунологической реактивности (рисунок 1). Это указывает на важное значение нейромедиаторной системы в регуляции нейроиммунных взаимодействий и делает очевидной перспективность разработки нейроиммуномодуляторов на основе аналогов ГАМК.

Рисунок 1. Показатели клеточного и гуморального звеньев иммунного ответа

при изменении активности ГАМК-ергической системы

Примечание: * - p<0,05 – достоверность различий по сравнению с контрольной группой (t-критерий Стьюдента с поправкой Бонферрони и Ньюмена-Кейлса для множественных сравнений)

Волгоградскими и астраханскими фармакологами и физиологами в тесном сотрудничестве с химиками Российского государственного педагогического университета им. А.И. Герцена (г.Санкт-Петербург) и Пятигорской государственной фармацевтической академии ведутся активные фармакологические разработки химических соединений, являющихся аналогами ГАМК.


загрузка...