Мониторинг микробиоценозов влагалища в системе  эпидемиологического надзора при инфекционно-воспалительных заболеваниях половой сферы (24.02.2009)

Автор: Наумкина  Елена Витальевна

Изучить частоту встречаемости геновидов уреаплазм при инфекционно-воспалительных заболеваниях половой сферы изолированно и в составе различных ассоциаций, дать оценку их антибиотикочувствительности и степени потенциальной патогенности на основании статистической обработки лабораторных и клинических данных.

Изучить состояние местного иммунитета влагалища у отдельных категорий больных, принадлежащих к группам риска, при различных вариантах нарушений нормальной микрофлоры, а также персистентные характеристики выделенных штаммов резидентных микроорганизмов и дать оценку взаимосвязи этих факторов и их влияния на выраженность клинических проявлений заболеваний.

На основании полученных результатов разработать рекомендации по рациональному подходу к диагностике, микробиологическому мониторингу и эпидемиологическому надзору за инфекционно-воспалительными заболеваниями половой сферы, вызванными условно-патогенными микроорганизмами.

Научная новизна и теоретическая значимость работы.

Впервые дана эпидемиологическая характеристика структуры, распространенности и особенностей эпидемического процесса вагинальных дисбиозов среди различных категорий женского населения по данным комплексного микробиологического обследования в современных условиях на примере мегаполиса, определены группы риска по возникновению различных вариантов нарушений вагинальной микроэкологии, изучена внутригодовая динамика выявляемости условно-патогенных возбудителей инфекций половой сферы.

Разработаны подходы к микробиологическому мониторингу микробиоценозов влагалища как основе эпидемиологического надзора при инфекционно-воспалительных процессах половой сферы, сформулирован оптимальный диагностический алгоритм, позволяющий получать достоверную информацию для последующего эпидемиологического анализа и назначения рациональной этиотропной терапии.

Дана интегральная оценка вагинального микробиоценоза как потенциального резервуара возбудителей при инфекционно-воспалительных заболеваниях вульвы, влагалища, придатков матки у различных категорий больных на основе комплексного применения микробиологических, современных молекулярно-генетических и иммунологических методов исследования.

Определена степень влияния основных и сопутствующих возбудителей на выраженность патологического процесса при бактериальных, микоплазменных и вирусных ассоциированных инфекциях.

Дана оценка роли видов Ureaplasma изолированно и в составе ассоциаций при различных вариантах состояния вагинального микробиоценоза, а также антибиотикочувствительности данных возбудителей, изучен характер изменения микробных ассоциаций в ходе этиотропной терапии.

Показана взаимосвязь состояния вагинального микробиоценоза, факторов местного иммунитета влагалища и биологических характеристик облигатной микрофлоры.

Практическая ценность работы и внедрение результатов исследования в практику.

В ходе выполнения работы разработана и апробирована комплексная методика микробиологического исследования вагинального отделяемого, изданы методические рекомендации для врачей-бактериологов МР 4.2.03 – 05 «Изучение вагинального микробиоценоза в комплексной диагностике инфекций влагалища», утвержденные Главным Государственным санитарным врачом Омской области 9.12.2005 г. Данная методика внедрена в практику работы бактериологических лабораторий кафедры микробиологии ОмГМА, Омского НИИПИ, Клинического медико-хирургического центра МЗ Омской области, Омской областной клинической больницы, МУЗ «Клинический родильный дом №1» г. Омска. Получен патент на изобретение «Способ микробиологической диагностики дисбактериозов влагалища» № 2293986 от 20.02.2007

Два выделенных штамма U.urealyticum и один – U.parvum депонированы во Всероссийском музее микоплазменных культур ГУ НИИЭМ им. Н.Ф. Гамалеи РАМН.

В рамках исследования разработана питательная среда для выращивания гарднерелл, оптимизировано применение жидких индикационных и плотных питательных сред для мико- и уреаплазм при диагностике урогенитальных инфекций, а также наборов для определения антибиотикочувствительности этих возбудителей (ООО НПФ «Диагност – мед», г. Омск).

Результаты работы используются в учебном процессе кафедры микробиологии ОмГМА, с использованием материалов исследования изданы методические рекомендации для студентов «Бактериологические исследования в клинике».- Омск, 2002; входят в программу циклов постдипломного усовершенствования врачей по специальностям «Бактериология» и «Клиническая лабораторная диагностика».

Апробация работы. Основные результаты работы доложены на IV научно-практической конференции «Актуальные вопросы здоровья населения Сибири: гигиенические и эпидемиологические аспекты». – Омск,2006; V межрегиональной научно-практической конференции с международным участием «Актуальные проблемы здоровья населения Сибири: гигиенические и эпидемиологические аспекты». – Омск,2004; Юбилейной конференции, посвященной 85-летию Омской Государственной медицинской академии. – Омск, 2006.

Публикации. По теме диссертации опубликовано 45 научных работ, в том числе 18 публикаций в изданиях, рекомендованных ВАК.

Структура и объем работы. Диссертация состоит из оглавления, введения, обзора литературы, описания материалов и методов исследования, 3 глав собственных исследований, заключения, выводов, указателя литературы. Работа изложена на 252 страницах, содержит 32 таблицы и 65 рисунков. Объем цитируемой литературы включает 239 наименований, в том числе 117 отечественных и 122 иностранных автора.

На защиту выносятся следующие положения.

Тенденция к росту заболеваемости урогенитальными инфекциями, вызванными условно-патогенными микроорганизмами, выявленная на примере города Омска и Омской области, определяется увеличением количества смешанных инфекций из двух и более компонентов, при снижении числа случаев моноинфекций.

Вероятность и тип нарушения вагинального микробиоценоза определяется наличием факторов риска (особенности сексуального поведения, акушерский анамнез, предшествующая антибактериальная терапия).

Внутригодовая динамика высеваемости условно-патогенных возбудителей урогенитальных инфекций характеризуется сезонными колебаниями, различными для изученных нозологических форм.

«Неспецифические возбудители», внося существенный вклад в структуру урогенитальной инфекционной патологии, увеличивают риск развития дисбиотических процессов после проведения этиотропной терапии; при этом проявлению патогенного потенциала факультативных представителей нормальной вагинальной микрофлоры способствует увеличение числа участников ассоциаций и персистенция вирусов в клетках вагинального эпителия.

Концентрация основного возбудителя при инфекциях, ассоциированных с мико- и уреаплазмами, определяет тяжесть клинических проявлений, причем геновид U.urealyticum обладает более значительным патогенным потенциалом, чем U.parvum.

Компенсированность патологического процесса при вагинальных дисбиозах определяется сохранностью облигатной микрофлоры, которая зависит от биологических характеристик вагинальных лактобактерий, определяющих их способность выживать в условиях патологических микробиоценозов; выраженность и характер местной иммунной реакции при этом определяются типом нарушения вагинального микробиоценоза.

Материалы и методы исследования.

1. Эпидемиологические методы.

В работе использованы описательно-оценочные, когортные и аналитические (случай-контроль) типы эпидемиологических исследований.

Для изучения эпидемиологических особенностей заболеваемости урогенитальными инфекциями, вызванными условно-патогенными возбудителями, нами были проанализированы данные официальной статистики, касающиеся этой патологии, по г. Омску и районам Омской области в период с 1999 по 2007 г. (ежегодные сборники МИАЦ «Статистические показатели состояния здравоохранения Омской области, здоровья населения, деятельности отрасли и служб»), а также результатов собственных исследований.

В период с 2002 по 2007 гг. на базе кафедры микробиологии, вирусологии и иммунологии ОГМА было обследовано 4708 больных из них 3560 женщин и 1148 мужчин, результаты обследования которых легли в основу анализа эпидемиологических закономерностей изучаемой патологии – высеваемости отдельных возбудителей, структуры ассоциированных инфекций, сезонной динамики по отдельным нозологическим формам.

Для изучения факторов риска и микробиологических особенностей генитальных инфекций были проанализированы результаты комплексного микробиологического обследования 1256 женщин. Возраст обследованных колебался от 13 до 65 лет и в среднем составил 27,8 ± 7,9 лет, большинство пациенток (96,1%) были репродуктивного возраста.

При обращении больных за гинекологической помощью проводилось анкетирование по специально разработанной анкете, содержащей ряд вопросов, позволяющих судить о наличии тех или иных факторов риска. Полученные сведения заносились в базу данных для последующей математической обработки.

Применительно к целям и задачам исследования были сформированы группы сравнения в зависимости от возраста, диагноза, наличия или отсутствия факторов риска, микробиологической картины.

2.Микробиологические методы.

Комплексное микробиологическое исследование включало микроскопию вагинальных мазков, а также количественный посев на расширенный набор питательных сред, обеспечивающих выделение широкого круга условно-патогенных микроорганизмов (УПМ), Gardnerella vaginalis, дрожжеподобных грибов, урогенитальных мико- и уреаплазм, лактобактерий с инкубацией в аэробных и микроаэрофильных условиях .

Часть выделенных культур уреаплазм (104) были исследованы на чувствительность к антибактериальным препаратам различных групп. Использовались наборы жидких сред для определения чувствительности молликут к антибиотикам (ООО НПФ «Диагност – мед», Омск).

Часть исследований (материал от 206 больных) было проведено с использованием строгой анаэробной техники. Посев материала из разведений проводили дополнительно на сектора анаэробного гемагара (Цвелев Ю.В., и др., 1995), инкубировали в анаэробных условиях с использованием Genbox anaer (BioMereiux) до 5 суток при 37оС.

У 27 больных также проводили микробиологическое исследование перитонеальной жидкости, полученной при лапароскопии или путем пункции через задний свод влагалища, с использованием аэробной и анаэробной техники.

Кроме того, проводилось исследование соскобов из уретры и цервикального канала на наличие хламидий методом прямой реакции иммунофлюоресценции (РИФ) с использованием «Хламоноскрин» (НИАРМЕДИК, Москва).

3.Молекулярно-генетические методы.


загрузка...