ФАКТОРЫ И УСЛОВИЯ, РЕГУЛИРУЮЩИЕ ФУНКЦИОНАЛЬНУЮ АКТИВНОСТЬ БУККАЛЬНЫХ ЭПИТЕЛИОЦИТОВ И ИХ ВЗАИМОДЕЙСТВИЕ С CANDIDA ALBICANS (21.04.2015)

Автор: Лукова Ольга Алексеевна

ЛУКОВА ОЛЬГА АЛЕКСЕЕВНА

ФАКТОРЫ И УСЛОВИЯ, РЕГУЛИРУЮЩИЕ ФУНКЦИОНАЛЬНУЮ АКТИВНОСТЬ БУККАЛЬНЫХ ЭПИТЕЛИОЦИТОВ И ИХ ВЗАИМОДЕЙСТВИЕ С CANDIDA ALBICANS

03.03.01 – физиология

03.02.03 – микробиология

А в т о р е ф е р а т

диссертации на соискание ученой степени

кандидата биологических наук

Москва – 2015

Работа выполнена на кафедре микробиологии и иммунологии Государственного бюджетного образовательного учреждения высшего профессионального образования «Нижегородская государственная медицинская академия» Министерства здравоохранения Российской Федерации 

Научный руководитель:

доктор биологических наук,

профессор

Заславская Майя Исааковна

Официальные оппоненты:

доктор медицинских наук, профессор, заведующий отделом санитарно-гигиенической безопасности человека в искусственной среде обитания Федерального государственного бюджетного учреждения науки Государственного научного центра Российской Федерации – Института медико-биологических проблем Российской академии наук

Ильин Вячеслав Константинович

кандидат биологических наук, доцент кафедры физиологии медико-биологического факультета Государственного бюджетного образовательного учреждения высшего профессионального образования «Российский национальный исследовательский медицинский университет имени Н.И. Пирогова» Министерства здравоохранения Российской Федерации 

Бакаева Занда Валерьевна

Ведущая организация:

Федеральное государственное бюджетное научное учреждение "Институт экспериментальной медицины" (ФГБНУ "ИЭМ"), 197376 Санкт-Петербург, ул. Акад. Павлова,12.

Защита диссертации состоится «____ »_____________ 2015 года в___ часов на заседании диссертационного совета Д 002.111.01, созданного на базе Федерального государственного бюджетного учреждения науки Государственного научного центра Российской Федерации – Института медико-биологических проблем Российской академии наук по адресу: 123007, г. Москва, Хорошевское шоссе д.76а.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Федерального государственного бюджетного учреждения науки Государственного научного центра Российской Федерации – Института медико-биологических проблем Российской академии наук по адресу (123007, г. Москва, Хорошевское шоссе д.76а).

Автореферат разослан «_____» _______________ 2015 года

Ученый секретарь диссертационного совета,

доктор биологический наук М. А. Левинских

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА ДИССЕРТАЦИИ

Актуальность проблемы

В настоящее время большое внимание уделяется поиску простых и неинвазивных методов выявления патологических изменений в организме человека. Одним из таких перспективных направлений является исследование функционального состояния эпителиоцитов слизистых оболочек, которое может служить источником важной диагностической и прогностической информации (Маянский А.Н. и соавт. 2004; Полякова В.О. и соавт., 2015). Функциональная активность мукозальных клеток находит отражение в процессах клеточной дифференцировки, синтезе различных молекул, экспрессии рецепторов и отражает состояние местного и общего гомеостаза организма человека, а также его нарушения при патологии и старении (Маянский А.Н и соавт., 2004; Пальцев М.А. и соавт., 2012; Полякова В.О. и соавт., 2015). Изменение функционального состояния эпителиоцитов является следствием различных воздействий на рецепторный аппарат клетки. Так, благодаря способности экспрессировать toll-подобные рецепторы (TLRs), эпителиальные клетки могут обнаруживать типовые молекулярные последовательности-паттерны (PAMPs) микробного или иного происхождения, не свойственные тканям человека (Полторак, А.Н., 2014; Brightbill H., Modlin R. 2000; Akira S., Hemmi H., 2003; Takeda K., Akira S., 2005; Naglik, J.R., HYPERLINK "http://www.ncbi.nlm.nih.gov/sites/entrez?cmd=search&db=PubMed&term=%20M oyes%20D%5Bauth%5D" Moyes D., 2011; McClure R., Massari P., 2014). TLRs являются мощными активаторами внутриклеточных сигнальных путей, таких как система нуклеарного фактора kB и МАР-киназ, которые способствуют синтезу функционально активных молекул (цитокины, молекулы межклеточной адгезии, рецепторы, белки острой фазы, ферменты, молекулы главного комплекса гистосовместимости и др.) мукозальными клетками (Маянский А.Н. и соавт., 2007; Baldwin A.S.Jr., 1996; Barnes P.J. et al., 1997; Andreakos E. et al., 2005; Hayden M. S., Ghosh S., 2011). Через продукцию данных медиаторов, эпителиоциты слизистых оболочек активно вовлекаются в воспалительные и иммунные реакции, транслируя сигналы лимфоцитам, макрофагам и дендритным клетками, присутствующим в lamina propria (Топтыгина А.П., Афанасьев С.С., 2009).

Для оценки функциональной активности эпителиоцитов слизистых оболочек в настоящее время используют различные методы, основанные на изучении их морфологии, выявлении клеточных маркеров и рецепторов (иммуногистохимия), продукции цитокинов, медиаторов, определении содержания ДНК (микроспектрофотометрия), а также уровня естественной колонизации нормальной микрофлорой (Банченко Г.В. и соавт. 1997; Быков В.Л.,1997; Абаджиди М.А. и соавт., 2003; Авдалян А.М. и соавт., 2003; Махрова Т.В., и соавт., 2004; Маянский А.Н. и соавт., 2005; Бочкарева О.П. и соавт., 2013; Полякова В.О. и соавт., 2015; Steele С., Fidel P.L., 2002). В то же время, функционирование рецепторного аппарата эпителиоцитов и его реактивность, т. е. способность отвечать на стимулы - изучены недостаточно. Также не в полной мере определен спектр экзогенных и эндогенных факторов, способных регулировать экспрессию рецепторов эпителиальных клеток, в частности, обеспечивающих адгезивные контакты с микроорганизмами.

В настоящей работе были использованы новые методические подходы для оценки функционального статуса клеток слизистых оболочек, основанные на изучении функционирования их рецепторного аппарата. Реактивность рецепторов эпителиоцитов оценивалась по экспрессии TLRs, а также по способности клеток к адгезивным взаимодействиям с тест-культурой Сandida albicans в процессе искусственной колонизации in vitro.

Целью работы является исследование функциональной активности рецепторного аппарата буккальных эпителиоцитов под влиянием различных факторов и условий, а также при взаимодействии с C. albicans и микробиотой полости рта.

Задачи исследования:

Определить влияние эндогенных и экзогенных факторов: половых гормонов, цитокинов, иммуномодуляторов, антисептиков и микробных метаболитов - на функциональную активность рецепторного аппарата эпителиоцитов слизистых оболочек при адгезивных контактах с C. albicans.

Проанализировать взаимоотношение систем нуклеарного фактора kB и митоген-активированных киназ с активностью рецепторного аппарата буккальных эпителиоцитов при адгезивных взаимодействиях с C. albicans.

Оценить экспрессию TLR-2 и TLR-4 буккальными эпителиоцитами под влиянием эндогенных и экзогенных факторов, а также, при хроническом пародонтите.

Сравнить уровень естественной колонизации буккального эпителия у пациентов с заболеваниями различного генеза до и после терапии с использованием иммуномодуляторов и оральных антисептиков.

Научная новизна

Впервые получены данные об изменении адгезивных свойств буккальных эпителиоцитов под действием эндогенных и экзогенных факторов: половых гормонов, цитокинов, иммуномодуляторов и антисептиков в системах с C. albicans in vitro.

Получены новые сведения о значении нуклеарного фактора kB для реализации контактных взаимодействий буккальных эпителиоцитов с С. albicans.

Впервые определен уровень экспрессии TLR-2 и TLR-4 на буккальных эпителиоцитах в норме и при пародонтите методом проточной цитофлюориметрии, а также выявлены субпопуляционные изменения среди TLR-2- и TLR-4-позитивных клеток под влиянием эндогенных и экзогенных факторов.


загрузка...