Особенности краевой эпизоотологии доминирующих бактериальных инфекций сельскохозяйственных животных в Республике Бурятия (20.12.2010)

Автор: Третьяков Алексей Михайлович

Изучение морфологических свойств 181 бактериальной культуры выделенной из проб почв скотомогильников, 5-ти районов Бурятии показало, что в почве преобладают палочковидные формы, грамположительные неспорообразующие бактерии (32,7%), спорообразующие (бациллы) – 42,5% и грамотрицательные палочковидные микробы – 11,9%. Шаровидных форм бактерий было выявлено всего 12,9%.

3.15.2. Биохимические характеристики микробных культур, выделенных из почвы

Изучение биохимических свойств микроорганизмов имеет большое, а некоторых случаях и решающее значение в определении их адаптивности во внешней среде и в целях родовой и видовой идентификации.

Биохимическая характеристика выделенных из почв скотомогильников микробных изолятов, выглядела следующим образом: 30 микробных культур (16,5%) образовывали индол; способностью образовывать сероводород обладало – 18 выделенных культур (9,94 %); малонат натрия – 131 культура (72,3 %); образовывали уреазу – 22 культуры (12,1 %); способностью выделять, а соответственно и образовывать каталазу обладали 99 культур бактерий или 54,6%; В-галактозидазу – 43 культуры (23,7%). Ферментировать с образованием кислоты глюкозу были способны 80 культу (44,1%), сахарозу – 100 культур (55,2%), лактозу – 28 микробных культур или 15,4%, сорбит – 38 культур (20,9 %), инозит – 14 культур (7,7 %), положительная реакция Фогес-Проскауэра отмечалась у 21 культуры (11,6%), наличие фенилаланина отмечали у 24 выделенных культур бактерий (13,2%), способностью разжижать желатин обладали 57 культур, что составило 31,4%, свертывать молоко – 85 культур (46,9 %), вызывать гемолиз эритроцитов барана – 92 культуры (50,8%).

Таким образом, из биохимических свойств микробных культур выделенных из почв скотомогильников, следует отметить высокий уровень их ферментативной активности, особенно протеолитической и сахаролитической, обеспечивающей метаболизм бактерий при неблагоприятных условиях окружающей среды. Выявленная у большинства (54,6%) почвенных микробных изолятов способность ферментировать каталазу рассматривается, многими учеными, как признак их психрофилии, направленной на сохранение активной жизнедеятельности в условиях минимального обеспечения тепловой энергией. Уреазная активность отмеченная у 12,1% микробных культур объясняется по данным ряда авторов возрастанием энергетической потребности бактерий, путем гидролиза мочевины.

3.15.3. Чувствительность микробных культур, выделенных из почвы скотомогильников, к некоторым антибиотикам

Изучение антибиотикочувствительности микроорганизмов, имеет теоретическое и практическое значение в вопросах терапии, и профилактики инфекционных болезней, а также при идентификации возбудителей последних.

Исходя из этого, нами была изучена чувствительность выделенных из почв скотомогильников микроорганизмов к некоторым антибиотикам (табл.32). Так, к бензилпенициллину сохраняли чувствительность 73 культуры (40,5%); тетрациклин эффективно подавлял размножение как грамотрицательных палочковидных, так и кокковидных форм бактерий – 145 культур (80,5 %); к левомицетину имели достаточную чувствительность 156 культур (86,6 %); неомицин подавлял рост 24 культур (13,3 %). Наибольший процент чувствительности к эритромицину проявляли грамположительные палочковидные и кокковидные бактерии – 123 культуры (68,3 %). Наименьший процент чувствительности к олеандомицину проявляли 68 культур (37,7 %). Высокую чувствительность к полимиксину имели грамположительные палочки 110 культур (61,1 %).

3.15.4. Персистентная характеристика выделенных из почв скотомогильников микробных культур

Анализ результатов проведенных исследований показал, что не все культуры обладали персистентными свойствами (факторами потенциальной патогенности). Так, было установлено, что из общего числа микробных культур выделенных из почв скотомогильников, 22,7% обладали антилизоцимной активностью (АЛА); 24,3 % культур – антиинтерфероновой активностью (АИА); 20,4% культур ДНК-азной и 31,5 % гемолитической – активностью. Из грамположительных палочковидных бактерий АЛА, обладали 28 культур (19,5 %), АИА 31 культура (21,6%) ДНК-азной 29 культур (20,2 %), гемолитической активностью 40 культур (27,9 %). Сомнительную гемолитическую активность проявили 12 культур (8,39 %).

У грамположительных кокков из 20-ти исследованных культур АЛА регистрировали у 3-х культур (15%); АИА у 5-ти культур (25%); ДНК-азную активность проявляли 3 культуры (15%); гемолитическую активность у 5-ти микробных культур (25%).

Из грамотрицательных палочковидных антилизоцимной активностью обладали 10 культур (43,4%); антиинтерфероновая активность наблюдалась у 8-ми культур (34,7 %); ДНК - азная активность у 5-ти культур (21,7 %); гемолитическая активность проявлялась 12-ти культур (52,1 %).

3.15.5. Экологическая характеристика микробных культур выделенных из почв скотомогильников

Знание экологических свойств выделяемых микроорганизмов имеет определенное значение для выявления оптимальных условий культивирования их на искусственных питательных средах, и изучения взаимоотношений микроорганизмов в популяциях и со средой обитания.

По нашим данным, незначительное смещение рН среды в кислую и щелочную сторону губительного действия на размножение бактерий не оказывало, однако более интенсивное накопление биомассы бактерий рода Bacillus наблюдали при рН бульона 7,2-7,4. Размножение выделенных из почвы бактерий данного рода затормаживался при понижении температуры до 19-20?С. Концентрации поваренной соли 0,85% и 0,05% в питательной среде оказались более благоприятными для размножения данных микроорганизмов, а при повышении содержания NaCl до 8,5% отмечали незначительное накопление микробных клеток.

В ходе эксперимента было установлено, что большая часть почвенных микроорганизмов наилучшим образом развивается при концентрации ионов водорода, близких рН 7,2 – 7,4, что характерно для естественных условий обитания. Кроме того, отмечали рост почвенных термофильных культур при температуре 41-42?С, что характерно для типичных мезофильных бактерий разных видов Bacillus в период их пребывания в почве.

3.16. Влияние абиотических факторов (антгельминтных препаратов) на микробиоценоз желудочно-кишечного тракта животных и синтез поствакцинальных антител

Из литературных данных известно, что некоторые антгельминтные препараты типа аверсект-2 угнетают естественную резистентность животных, ингибируют синтез поствакцинальных антител, повышая, таким образом, чувствительность к инфекциям. Вопрос о влиянии антгельминтиков на постоянных представителей кишечной микрофлоры остается до конца не раскрыт, что и послужило причиной изучения влияния некоторых антгельминтиков на энтеробиоценоз сельскохозяйственных животных.

3.16.1. Динамика количественного и качественного состава

микрофлоры кишечника овец под влиянием антгельминтика аверсект-2 (1%-ного)

Исследования проводили на пяти спонтанно инвазированных кишечными трихостронгилидами овцах двухлетнего возраста живой массой около 40 кг. При дегельминтизации животных использовали антгельминтик аверсект-2, который вводили подкожно в дозе 0,8 мл на кг массы тела.

Копрологические исследование проводили до дегельминтизации, на первые и пятые сутки после дегельминтизации.

До дегельминтизации число бифидобактерий составляло – (350±14,2)х105 КОЕ/г, сальмонелл – (6,5±1,7)х103, энтеробактерий – (8,25±4,07)х107, стафилококков – (3,0±0,84)х104, дрожжеподобных грибов – (5,3±2,50)х105, гемолизирующей кокковой и энтеропатогенной микрофлоры – (6,6±2,50)х104, клостридий – (2,6±1,40)х105.

Через сутки после дегельминтизации число бифидобактерий снизилось – до (2,7±1,50)х105, энтеробактерий – до (3,1±2,31)х107, клостридий возросло до (8,6±1,70)х105, сальмонелл – до (17,9±13,4)х103, незначительно возрастало число дрожжеподобных грибов, не высевались гемолизирующая микрофлора и стафилококки.

На пятые сутки число бифидобактерий продолжало снижаться до (0,5±0,26)х106 микробных клеток в 1г, уменьшалось количество сальмонелл – до (7,9±1,96)х103, численность клостридий возросла – до (30,0±5,6)х105, энтеробактерий – до (399,5±93,3)х107, грибов – до (350,0±8,85)х105 КОЕ/г фекалий. Вновь высевались стафилококки в количестве (2,0±0,76)х104 и гемолизирующая микрофлора – (2,5±2,4)х104.

Таким образом, антгельминтик аверсект-2 в лечебной дозе вызывает изменение в составе микрофлоры толстого кишечника, которое характеризуется достоверным увеличением числа условно-патогенной микрофлоры (энтеробактерий, клостридий, дрожжеподобных грибов) и одновременно достоверным снижением концентрации бифидобактерий, представителей полезной микрофлоры.

3.16.2. Изменение количественного и качественного состава микрофлоры кишечника свиней под влиянием антгельминтика аверсект-2

До дегельминтизации антгельминтиком аверсект-2 в 1г фекалий свиней до обработки концентрация бифидобактерий равнялась – (407±10,9).104; сальмонелл – (1,8±1,1).103; энтеробактерий – (1888±793,3).106; гемолизирующей микрофлоры – (33±8,8).105; клостридий – (3,0±1,3).105; дрожжеподобных грибов – (4,5±2,21).106; стафилококков – (6830±40,3).103, КОЕ/г.

Через сутки после дегельминтизации отмечали снижение количества бифидобактерий – до (2,0±0,39).104, сальмонелл – до (3,5±0,11).103, энтеробактерий – до (0,04±0,006).106, клостридий – до (0,7±0,3).105, стафилококков – до (0,2±0,06).103 микробных клеток в 1г, число дрожжеподобных грибов увеличивалось – до (22,0±21,3).106 микробных клеток.

На пятые сутки после дегельминтизации отмечали увеличение числа энтеробактерий – до (0,1±0,05).106, гемолизирующей микрофлоры – до (6,7±3,8).105, уменьшение числа стафилококков – до (5,4±5,7).103, незначительно возрастало число бифидобактерий – до (4,3±1,89) .104, клостридий – до (10,7±2,5) .105, грибов – до (3,4±1,19) .106 и сальмонелл – до (2,9±1,6) .103.

Таким образом, при экспериментальной дегельминтизации свиней аверсект-2 приводит к достоверному уменьшению числа бифидобактерий, стафилококков, энтеробактерий и гемолизирующей микрофлоры.

3.16.3. Изменения в составе микрофлоры кишечника овец под влиянием антгельминтиков сантел и клозальбен-10

В результате проведенных исследований было установлено, что антгельминтик сантел так же, как и аверсект–2 изменяет соотношение ранее сложившегося микробного равновесия в кишечнике овец в сторону достоверного снижения полезной микрофлоры (бифидобактерии) при одновременном увеличении концентрации условно патогенных бактерий, на пятые сутки после дегельминтизации.

Под влиянием антгельминтика клозальбен-10, по нашим данным, достоверно снижается число бифидобактерий, увеличивается концентрации клостридий, дрожжеподобных грибов – на пятые сутки после дегельминтизации. На 15–е сутки из фекалий овец уже не высевались сальмонеллы, клостридии, гемолизирующая микрофлора и стафилококки.

3.17. Коррекция микробиоценоза желудочно-кишечного тракта овец после дегельминтизации пробиотиком ветом-3.

Для коррекции микробиоценоза желудочно-кишечного тракта овец после их дегельминтизации против трихостронгилид был использован пробиотик ветом-3, который является иммобилизованной высушенной споровой биомассой бактерий Bacillus subtilis ВКПМ В-7048 с наполнителем. Препарат с профилактической целью применяли 1 раз в сутки per os в дозе 50 мг/кг массы ежедневно в течение 7 суток после дегельминтизации.

Были проведены микробиологические исследования фекалий животных до – и после лечения данным средством на 3,7 и 15-й дни.

У овец контрольной группы антгельминтик аверсект-2 через трое суток после дегельминтизации достоверно вызывал снижение числа энтеробактерий и увеличение количества стафилококков. В последующие дни исследований содержание стафилококков достоверно уменьшалось, сохранялась тенденция уменьшения концентрация энтеробактерий и бифидобактерий.

У животных, получавших пробиотик ветом-3 после дегельминтизации аверсектом-2, в качественном и количественном составе микрофлоры кишечника развивались позитивные изменения уже на 3-и сутки после дегельминтизации животных.

Результаты наших исследований показали, что используемый в практике для дегельминтизации препарат широкого спектра действия аверсект-2 приводит к изменению количественного и качественного состава микрофлоры кишечника овец. Использование же пробиотика ветом-3 в течение 7 дней подряд (после обработки аверсектом-2) позволяет в короткие сроки нормализовать микрофлору кишечника, восстановить ее качественный и количественный состав.


загрузка...