МИКРОЭКОЛОГИЧЕСКИЕ НАРУШЕНИЯ У МАТЕРИ И РЕБЕНКА: ДИАГНОСТИКА, ПРОГНОСТИЧЕСКОЕ ЗНАЧЕНИЕ (15.07.2011)

Автор: Николаева Ирина Венидиктовна

? 1 год (груд.вскарм.) 1-2 года > 2 лет

Бифидобактерии 109-1011 108-1010 108-1010

Лактобациллы 107 107 106-107

Бактероиды 107-108 109 -1010 109 -1010

М/к стрептококк 106-107 107 107

Энтерококк 106-107 106-107 107-108

E. сoli типичные 107-108 107-108 107-108

E. сoli лактозонегативные (106 (106 ( 10 5

E. сoli гемолизирующие (105 (105 (105

Другие условно-патогенные энтеробактерии* ?105 <104 <104

Неферментирующие бактерии** <104 <104 <104

S.aureus ?104 ?104 <103

S.epidermidis (105 (105 (105

Клостридии <104 <104 105

Грибы рода Candida ?104 <104 <104

* - представители родов Klebsiella, Enterobacter, Serratia, Proteus, Citrobacter, Enterobacter

** - Pseudomonas, Acinetobacter и др.

Выявленные различия в составе КМФ у детей разных возрастных групп позволили выделить 3 этапа в развитии КМФ в постнеонатальном периоде: «младенческий» (1 месяц – 1 год), «переходный» (1 г –2 г) и этап «взрослой микробиоты» (старше 2 лет). В связи с этим, мы считаем целесообразным введение нормативных показателей для 3 возрастных групп: для детей первого года жизни, детей в возрасте от 1 до 2 лет и старше 2 лет. Для определения нормативных показателей использовался межквартильный интервал – с 25% до 75%.

Выявлено, что у здоровых детей первого года, получающих грудное вскармливание, по сравнению с общепринятыми нормами, допустимо более низкое содержание бифидобактерий (109 КОЕ/гр фекалий); более высокое содержание (?105 КОЕ/гр) Klebsiella spp., Proteus spp., Enterobacter spp, Citrobacter spp; гемолизирующих эшерихий (?104 КОЕ/гр), а также S.aureus (?104 КОЕ/гр) и грибов рода Candida (?104 КОЕ/гр) (таблица 3). У детей в возрасте от 1 года до 2 лет допустим популяционный уровень бифидобактерий 108 КОЕ/гр, S.aureus ? 104 КОЕ/гр, гемолизирующих эшерихий ?104 КОЕ/гр. Содержание клостридии у детей первых 2 лет не должны превышать 103 КОЕ/гр. У детей старше 2 лет полученные показатели состава кишечной микрофлоры соответствуют общепринятым нормативным показателям состава кишечной микрофлоры у взрослых людей.

Характеристика кишечных лактобактерий, выделенных у здоровых детей грудного возраста.

Определение видового состава индигенных бактерий их антагонистической активности, антибиотикорезистентности в настоящее время является неотъемлемой частью исследований состава кишечной микрофлоры у людей разного возраста, проживающих в разных регионах мира. Результаты видовой идентификации кишечных штаммов лактобацилл, выделенных у детей грудного возраста г. Казани, показали, что доминирующими видами в данной возрастной группе являются L.fermentum и L.rhamnosus, которые обнаружены соответственно у 60% и 50% обследованных детей. Как известно, эти виды лактобацилл часто обнаруживаются в составе микрофлоры грудного молока. L.casei (25%), L. paracasei (15%) встречались только у детей, получавших прикормы. Ни у одного ребенка не обнаружены микробы видов L. acidophilus, L.plantarum и L.zeae. У детей, получавших искусственное вскармливание, выделялись преимущественно нетипированные в нашем исследовании виды лактобактерий. Для детей, получавших грудное вскармливание, а также прикормы на этом фоне, было характерно наличие ассоциаций 2-3 видов лактобактерий со стабильным присутствием L.fermentum и L.rhamnosus. Производственный штамм L.fermentum 90-4С (ГИСК) по данным ПЦР c видоспецифическими праймерами, проведенной в НИИЭМ им.Н.Ф.Гамалеи (Москва), был отнесен к виду L.plantarum.

Выявлена различная степень антагонистической активности (АА) клинических изолятов лактобацилл по отношению к S.aureus и гемолизирующей E.сoli. 8 из 18 изученных клинических изолятов лактобактерий плохо подавляли рост S. aureus. 5 изолятов лактобактерий не подавляли рост, а 3 штамма имели низкую АА по отношению к гемолизирующей E.сoli. У всех клинических изолятов лактобактерий отсутствовала АА по отношению к штаммам Kl. рneumoniae, Kl.оxytoca, Proteus mirabilis, Proteus vulgaris, Citrobacter freundii (рост культур сплошным газоном). Выявлено, что у детей, колонизированных лактобактериями с высокой АА к S.aureus, данный микроорганизм в составе фекальной микрофлоры обнаруживался реже, чем при колонизации лактобактериями с низкой АА (р?0,02, F-критерий). В большинстве случаев дети были колонизированы теми видами Гр- энтеробактерий (Kl. pneumoniae, Kl.оxytoca, Proteus mirabilis), к которым лактобактерии не проявляли АА в эксперименте in vitro. Колонизация Гр- энтеробактериями у всех детей выявлялась на фоне нормального количественного содержания лактобактерий. Данный факт свидетельствует об относительности количественного критерия (определения популяционного уровня индигенных микроорганизмов) и необходимости исследования АА представителей облигатной микрофлоры для оценки колонизационной резистентности ЖКТ.

Среди изученных выявлены штаммы лактобактерий с потенциально пробиотическим эффектом: 5 штаммов лактобактерий, обладающие высокой АА по отношению к S. aureus и 4 штамма высокой АА по отношению гемолизирующей E.сoli. Наибольший интерес с этой точки зрения представляет штамм L. fermentum № 30/4, обладающий высокой АА в отношении обоих микроорганизмов.

Установлена высокая частота резистентности кишечных лактобактерий к наиболее часто используемым антибиотикам и химиопрепаратам. Все лактобактерии были полирезистентны и имели от 8 до 15 маркеров резистентности. Все штаммы кишечных лактобактерий были резистентны к фуразолидону, ципрофлоксацину, котримоксазолу, цефтриаксону, нитроксолину, метронидазолу. 75% штаммов проявляли резистентность к амикацину и ампициллину, 65% штаммов – к амоксиклаву и цефотаксиму. 70% штаммов были чувствительны к пенициллину и линезолиду, 60- 65% - к эритромицину и линкомицину. Таким образом, выявлен ряд региональных особенностей видового состава, антагонистической активности и антибиотикорезистентности кишечных лактобактерий у детей грудного возраста. Полученные данные следует учитывать при назначении детям антибактериальных препаратов по поводу интеркуррентных инфекций и выборе пробиотиков для коррекции состава кишечного микробиоценоза.

Особенности формирования кишечной микрофлоры и клинических проявлений дисбактериоза кишечника у детей, рожденных естественным путем и путем кесарева сечения

Мы оценили особенности кишечного микробиоценоза и клиническое значение дисбактериоза кишечника у детей рожденных естественным путем (ЕР) и путем кесарева сечения (КС) в процессе длительного наблюдения (3 года). Исследования показали, что процесс формирования кишечного биоценоза имеет существенные различия в этих группах больных. Дети, рожденные путем КС, в течение всего периода раннего детства, достоверно чаще имели различные варианты нарушения КМФ, чем дети, рожденные естественным путем. Эубиоз достоверно чаще имели дети из группы ЕР в возрасте от 6 месяцев до 3 лет (р=0,02-0,001; F-критерий) Так, нормальный состав кишечной микрофлоры выявлен в группе ЕР в возрасте 1-2 месяцa – в 4,9%, в 6-12 месяцев – в 15%, в 1-2 года – в 33,3% и в 2-3 года – в 66,6% случаев. У детей, рожденных путем КС, эубиоз выявлен в возрасте 1-2 месяцa – в 1,1%, в 6-12 месяцев – в 3,4%, в 1-2 года – в 9%, и в 2-3 года – в 25,8% случаев. До 2 лет жизни у них достоверно чаще, чем у детей из группы ЕР обнаруживался дефицит бифидобактерий (р=0,02-0,03; F-критерий), и (или) лактобактерий (р=0,003-0,04; F-критерий). E. Coli в количестве 7-8 lg КОЕ/г обнаруживались в обеих группах приблизительно с равной частотой. Энтерококки в количестве 5-7 lg КОЕ/г достоверно чаще обнаруживались у детей из группы ЕР в возрасте до 1 года (р=0,003).

В обеих группах детей, выявлена высокая частота колонизации кишечника УПМ (таблица 4). В возрасте старше 1 года УПМ у детей из группы КС обнаруживались чаще, чем у детей, рожденных естественным путем (р=0,01: F-критерий). Для детей, рожденных КС, было характерно более выраженное видовое разнообразие факультативной флоры и только у них в грудном возрасте обнаружены Serratia spp., Morganella morganii, P.aeruginosa. Дети из группы КС чаще были колонизированы ассоциациями УПМ в возрасте до 1 года. Персистенция УПМ выявлена у всех детей, рожденных КС и только в 54,7% случаев естественных родов (р<0,001, F-критерий), причем в 32% случаев у детей первой группы персистировали ассоциации микроорганизмов. Известно, что процесс персистенции УПМ лежит в основе развития затяжных и хронических воспалительных процессов, а также сенсибилизации организма ребенка (Бухарин О. В. и соавт., 2007; Бондаренко В.М., Рябиченко Е.В., 2005, 2009). Выявленные особенности состава КМФ у детей, рожденных путем КС, мы связываем с тем, что, они не получают в родах индигенной флоры матери, поздно прикладываются к груди, длительно находятся в роддоме и вскармливаются на фоне антибактериальной терапии матери в послеоперационном периоде.

Особенности микробной колонизации детей, рожденных кесаревым сечением, несомненно, имеют клиническое значение. По данным литературы в этой популяции детей отмечается более высокая частота развития атопических заболеваний, кишечных инфекций, что связывается с нарушением процессов формирования КМФ и иммунной системы (Bager P., 2008; Decker E. et al., 2010). Мы проанализировали клиническую симптоматику дисбактериоза кишечника у 77 детей, рожденных путем КС, и 72 детей, рожденных естественным путем, и выявили, что у детей первой группы ДБК протекает с более выраженной клинической симптоматикой и имеет тенденцию к затяжному течению. Компенсированные формы ДБК были более характерны для детей из группы ЕР (20,8% и 9,1% соответственно, р?0,02; F-критерий), а декомпенсированный ДБК достоверно чаще развивался у детей, рожденных путем КС (16,9% и 4,2%, р?0,01; F-критерий).

Таблица 4

Частота колонизации детей условно-патогенными микроорганизмами при различном способе родоразрешения

Микроорганизмы Число детей абс. (%)

1-2 мес 6-12 мес. 1-2 г. 2-3 г.

КС(n=91) EР(n=82) КС(n=87) EР(n=60) КС(n=69) EР(n=50) КС(n=31) EР( n=33)

Частота

колонизации УПМ 84 ( 92,3%)

75 (91,5%) 64 (73,6%) 40 (66,7%) 46 (66,7%) 22 (44%) Р*=0,01 17 (54,8%) 8 (24,2 %)

Частота выделения

ассоциаций УПМ 66 (72,5%%)

41(50%)

Р*<0,01 44 (50,6%) 13 (21,7%)


загрузка...