Аналитические подходы к лабораторной диагностике социально значимых вирусных заболеваний (11.10.2010)

Автор: Сидорова Ирина Флуровна

В различных регионах циркулируют свои разновидности вируса гепатита В, поэтому постоянное изучение и контроль диагностических возможностей тест-систем в отношении «диких» и мутантных вариантов HBsAg является актуальным (Баженов Ф.И. и др., 2008, Weber B., 2005). «Ускользающие» HBsAg мутанты способны уходить от иммунологического, вакцинального или диагностического контроля. Влияние на диагностику генетической вариабельности вируса гепатита В определяется по уровню разрешения чувствительности иммунологических и молекулярно-биологических тестов. Ошибки при выявлении "ускользающих" HВsAg-мутантов вируса гепатита В обусловлены, прежде всего, широким использованием в современных диагностических тест-системах моноклональных антител (мАТ) к HBsAg. Применение в тест-системах мАТ, по сравнению с использованием поликлональных антител, повышает специфичность иммунодетекции HBsAg "дикого" типа. Однако, с другой стороны, их относительно узкая специфичность способна ограничивать возможности выявления мутантного HBsAg. Выявление мутантных форм HBsAg с такой же чувствительностью, которая достигнута для HBsAg «дикого» типа, является нерешенной проблемой. По мнению Scheiblaauer H. (2006) необходимо продолжать мониторинг чувствительности тест-систем для выявления HBsAg, исследовать значимость разных мутантных форм для иммуноферментной диагностики вирусного гепатита В.

Нам представляется важным оценить диагностические возможности разрешенных к применению в практике российского здравоохранения коммерческих иммуноферментных тест-систем отечественного производства в отношении разных субтипов и мутантных штаммов HBsAg.

Для проведения сравнительного исследования были взяты иммуноферментные наборы реагентов, предназначенные для выявления поверхностного антигена вируса гепатита В четырех российских производителей – «ДС - ИФА - HBsAg» (ООО «НПО «Диагностические системы»), «ИФА – HBsAg» (ЗАО «Эколаб»), «HBs - антиген - ДС» (ЗАО «Медикобиологический союз») с чувствительностью 0,1 МЕ/мл и «Вектогеп В - HBsAg» (ЗАО «Вектор-Бест») с чувствительностью 0,05 МЕ/мл.

Предварительно чувствительность взятых для сравнения тест-систем была проверена по отраслевому стандартному образцу HBsAg. Во всех четырех наборах он определялся в концентрации 0,125 МЕ/мл, что свидетельствует об их хорошей чувствительности при выявлении «дикого» типа поверхностного антигена вируса гепатита В.

В качестве контрольного материала была использована коммерческая панель сывороток, содержащих разные субтипы и мутантные формы HsAg в трех разведениях, представленные в таблице 5.

Таблица 5

Характеристика панели сывороток, содержащих HBsAg

№ сыворотки

панели Субтип, мутант

HBsAg Концентрация, у.е./мл, (1 у.е.=1 МЕ/мл)

1 ayw2 0,1

2 ayw2 0,05

3 ayw2 <0,05

4 ayw3 0,1

5 ayw3 0,05

6 ayw3 <0,05

7 ayw3,Var.A 0,1

8 ayw3,Var.A 0,05

9 ayw3,Var.A <0,05

10 ayw3,Var.B 0,1

11 ayw3,Var.B 0,05

12 ayw3,Var.B <0,05

13 adrq+ 0,1

14 adrq+ 0,05

15 adrq+ <0,05

16 ayw2 T134P 0,1

17 ayw2 T134P 0,05

18 ayw2 T134P <0,05

19 ayw3 S143L 0,1

20 ayw3 S143L 0,05

21 ayw3 S143L <0,05

22 adw3 G145R 0,16

23 adw3 G145R 0,08

24 adw3 G145R <0,05

Таблица 6

Результаты выявления образцов панели разными тест-системами

Номер образ

ца Концентра

ция «ДС-ИФА-HBsAg»

ОП Крит-0,075 «Вектогеп В- HBsAg»


загрузка...