ИММУНОПАТОГЕНЕТИЧЕСКИЕ МЕХАНИЗМЫ УГРОЗЫ ПРЕРЫВАНИЯ БЕРЕМЕННОСТИ (10.04.2009)

Автор: Левкович Марина Аркадьевна

CD 25+,% 3,7±0,6* 1,1±0,4 3,5±0,8* 1±0,2 5,6±0,9* 1,3±0,3

10 9/л 0,1±0,01* 0,01±0,004 0,1±0,02* 0,01±0,002 0,1±0,02* 0,02±0,004

CD 71+,% 3,2±0,6* 2,1±0,5 4,1±0,8* 2,5±0,3 3,3±0,7* 1,2±0,4

10 9/л 0,1±0,01* 0,02±0,01 0,1±0,02* 0,03±0,003 0,1±0,01* 0,02±0,01

HLADR+,% 12,2±0,7* 6,4±0,9 11,4±0,8* 8,9±1,0 12,9±1,4* 8,7±1,0

10 9/л 0,2±0,02* 0,1±0,01 0,2±0,02* 0,1±0,01 0,2±0,03* 0,1±0,01

CD11b+,% 14,7±1,2* 5,7±0,8 13,2±1,2* 7,9±0,9 15,6±1,1* 8,1±0,8

10 9/л 0,2±0,02* 0,1±0,01 0,3±0,02* 0,1±0,01 0,3±0,02* 0,1±0,01

CD 54+, % 13,2±2,0* 6,5±0,7 13,8±1,9* 8,1±1,1 15,5±2,7* 8,4±1,1

10 9/л 0,2±0,1* 0,1±0,01 0,3±0,04* 0,1±0,01 0,3±0,1* 0,1±0,01

Примечание: * - p<0,05, достоверность различий показателей по сравнению с группой женщин с физиологическим течением беременности

Выявлено достоверное усиление процессов ранней и поздней активации в субпопуляциях лимфоцитов, обладающих хелперно-индукторными свойствами (CD4+CD69+ и СD4+ НLA-DR+), кроме того, отмечено повышение маркеров ранней (CD69+, CD25+) и поздней активации (НLA-DR+) на поверхности CD8+ по сравнению с группой с физиологическим течением беременности во всех исследуемых триместрах (табл.3).

В настоящее время большое внимание уделяется изучению взаимодействия клеток иммунной системы при различных иммунопатологических состояниях. Одним из важнейших их свойств является способность к миграции, что позволяет им осуществлять основную функцию иммунного надзора и реализуется при помощи молекул адгезии, способствующих более эффективному взаимодействию с клетками-мишенями. Анализ количества лимфоцитов, экспрессирующих молекулу CD11b+, участвующих в иммунном воспалении через механизм межклеточной адгезии, выявил их значительное увеличение в подгруппе Iа во всех трех триместрах гестации (табл.2).

Особенно выраженные отличия отмечены в I триместре – содержание CD11b+ повышалось в 2,6 раза по сравнению с показателями в группе с физиологическим течением беременности.

Таблица 3

Экспрессия маркеров активации в субпопуляциях Т-лимфоцитов и NK у женщин I группы при угрозе прерывания беременности и группы с физиологическим течением беременности

Показатель I триместр II триместр III триместр

Физ. течение

Физ.течение

Физ.течение

CD4+CD69+ , % 1,5±0,1* 0,2±0,01 1,5±0,1* 0,2±0,01 1,2±0,2* 0,2±0,05

CD4+CD25+, % 0,7±0,2 0,5±0,01 0,8±0,2 0,5±0,01 0,7±0,2 0,5±0,01

CD4+DR +, % 1,8±0,1* 0,2±0,02 1,9±0,1* 0,2±0,03 1,8±0,1* 0,2±0,01

CD8+CD69 +, % 2,3±0,2* 0,3±0,03 2,3±0,2* 0,3±0,02 2,4±0,2* 0,3±0,02

CD8+CD25 +, % 1,4±0,2* 0,5±0,08 1,4±0,1* 0,5±0,01 1,2±0,2* 0,5±0,01

CD8+DR+ , % 1,3±0,1* 0,6±0,07 1,3±0,1* 0,6±0,06 1,1±0,1* 0,5±0,08

CD16+CD69+, % 0,4±0,1 0,2±0,01 0,3±0,1 0,2±0,01 0,4±0,08 0,2±0,01

CD16+CD25+, % 1,4±0,1* 0,4±0,01 1,5±0,1* 0,4±0,01 1,5±0,1* 0,6±0,02

CD16+ DR+ , % 0,4±0,1 0,3±0,04 0,5±0,01 0,3±0,04 0,4±0,02 0,2±0,05

Примечание: * - p<0,05, достоверность различий показателей по сравнению с группой женщин с физиологическим течением беременности

При этом количество лимфоцитов, экспрессирующих CD11b+ прямо коррелировало, как с содержанием в сыворотке крови IL-8 (rs= 0,43, p=0,04), так и с уровнем IL-1 ? (rs= 0,47, p=0,026). Увеличение экспрессии CD11b+ при угрозе прерывания беременности может свидетельствовать о значительной напряженности иммунных реакций на фоне урогенитальной инфекции. К межклеточным взаимодействиям в иммунной системе прямое отношение имеют интегрины. Анализ количества лимфоцитов, экспрессирующих CD54+(IСAM-1) показал их повышение в подгруппе Iа по сравнению с группой с физиологическим течением беременности всех трех триместрах гестации (табл.2). Возможно, что CD54+ (IСAM-1) экспрессируется под влиянием цитокинов IL-1 ?, TNF-?, IFN-? , что коррелирует с активностью инфекционного воспаления и активизацией процессов межклеточного взаимодействия.

Значительную роль в механизмах сохранения клеточного баланса, регулируемой клеточной гибели играет апоптоз. С помощью механизма апоптоза удаляются аутоспецифичные клоны и клетки, реализуется клеточно-опосредованный цитолиз (Сотникова Н.Ю. и соавт., 2005; Galan A. et al., 2000). Учитывая важное значение процессов апоптоза в поддержании гомеостаза, было проанализировано содержание лимфоцитов, экспрессирующих Fas рецептор CD95+, как маркер поздней активации, характеризующий готовность к апоптозу. Оказалось, что в подгруппе Iа по сравнению с группой с физиологическим течением беременности отмечалось достоверное повышение CD95+ как в общей популяции, так и в субпопуляции СD4+ уже в I триместре (11,9±0,9% и 6,6±0,1%, соответственно), аналогичные сдвиги отмечены во II и III триместре. Известно, что система Fas-/FasL способствует ограничению избыточного иммунного ответа. Таким образом, обнаруженное нами при угрозе прерывания беременности повышение CD95+ может указывать на возможное участие Fas -системы в реализации иммунного ответа на воспаление. Проведенное сравнение содержания СD95+ в субпопуляциях лимфоцитов с цитотоксической активностью (CD8+ и CD16+) отметило тенденцию к снижению в подгруппе с угрозой прерывания, однако статистически значимых различий в группах, оппозитных по течению беременности не было выявлено.

Кроме оценки уровня экспрессии лимфоцитами СD95+, нами определялось количество клеток, вступивших в апоптоз, на основании их способности фиксировать на своей поверхности AnnexinV+ и PI+. Полученные результаты свидетельствуют о том, что в периферической крови женщин в подгруппе Iа по сравнению с группой с физиологическим течением беременности выявлено достоверное повышение как ранних (AnnexinV+), так и поздних (AnnexinV+ PI+) маркеров апоптоза во все сроки наблюдения, наиболее выраженные отличия отмечены в III триместре (14,2±2,0% против 6,2±0,5% и 1,3±0,3% против 0,7±0,1%, соответственно). Возможно, что реакция усиления апоптоза обусловлена необходимостью элиминации активированных лимфоцитов при урогенитальной инфекции.

В последние годы большой интерес вызывает изучение механизмов врожденного иммунитета, представляющих первую линию защиты организма от различных патогенов. Распознающими рецепторами врожденной иммунной системы являются TLR – рецепторы, которые экспрессируются на клетках моноцитарной системы и распознают связанные с патогенами паттерны, присутствующие на инфекционных агентах (Flo T. H. et al., 2001; Haruta Y. et al., 2007). Клетки врожденного иммунитета важны при нормальной беременности для обеспечения успешной имплантации и для разрешения инфекции в зоне мать-плацента-плод, они же могут способствовать развитию осложнений беременности (Макаров О.В., 2007). В нашем исследовании в подгруппе Iа выявлено достоверное повышение экспрессии TLR –2 (CD282+) и TLR – 4 (CD284+) на моноцитах периферической крови во всех исследуемых триместрах. При этом в I триместре уровень экспрессии TLR-2(CD282+) составил 77,1±4,7% против 39,3±4,2% в группе с физиологическим течением беременности и коррелировал с маркерами раннего апоптоза (rs=0,90, p=0,03). Возможно, что грамм-положительные бактерии, экспрессирующие пептидогликан или липотейхоевую кислоту могут вызывать гибель клеток трофобласта через активацию TLR –2 (Abrahams V.M., 2005). Во II триместре количество моноцитов, экспрессирующих рецепторы к TLR-4(CD284+) составило 67,4±4,3% против 30,8±3,5% в группе с физиологическим течением беременности, была выявлена взаимосвязь с содержанием IL-1 ? (rs= 0,9, p=0,03). Наши данные согласуются с исследованиями Ковальчук Л.В. и соавт. (2005), сообщающих, что в раннюю фазу врожденного иммунного ответа взаимодействие микроорганизмов с TLR - 4 индуцирует синтез активационных молекул, хемокинов, провоспалительных цитокинов опасных для состояния беременности. На основании полученных данных можно заключить, что обнаруженное нами усиление экспрессии TLR –2 и TLR –4 может обусловливать их непосредственное участие в развитии угрозы прерывания беременности.

По данным современных исследований, основными медиаторами взаимодействия клеток иммунной системы между организмом матери и плода являются цитокины, играющие важную роль в репродукции - имплантации, росте и развитие эмбриона. Посредством цитокинов и их рецепторов происходит взаимодействие между трофобластом и децидуальными клетками, что обеспечивает толерантность между организмом матери и плодом (Zhang J. et al., 2003). Результатом межклеточного взаимодействия является экспрессия про- и противовоспалительных цитокинов. Несмотря на интенсивные исследования в области иммунологии репродукции, до настоящего времени остается не до конца изученной роль различных цитокинов в генезе физиологической беременности, окончательно не решены вопросы определения скрининговых маркеров ее патологического течения.

Известно, что IL-1 ? является центральным медиатором локальных и системных воспалительных реакций (Симбирцев А.С., 2002). Связывание IL-1 ? с рецепторами в материнском организме является необходимым для имплантации, стимулирует пролиферацию клеток, образующих плацентарный барьер, избирательно активирует процессы синтеза и секреции стероидных гормонов, уровень которых оказывает влияние на течение беременности (Coulam C.,2000). С другой стороны, для IL-1 ? характерна способность стимулировать продукцию простагландинов, тем самым запускать механизмы преждевременного отторжения плода (Dinarello C.A., 2002; Xia H. et al., 2006).

В нашем исследовании в подгруппе Iа по сравнению с группой с физиологическим течением беременности уже в I триместре отмечается достоверное повышение содержания IL-1? в как сыворотке крови, так и в цервикальной слизи имеющее прогрессирующее увеличение в динамике гестации (табл.4). Интересные данные получены в I триместре об обратной корреляционной зависимости между содержанием в цервикальной слизи IL-1? и IL-10 (rs=-0,51, p=0,004). Возможно, что повышенная секреция IL-1 ? при инфекционной патологии приводит к провоспалительному каскаду, тем самым запуская механизмы преждевременного отторжения плода, а супрессия IL-10 отменяет ингибирующие эффекты клеточно-опосредованного иммунитета, который несовместим с формированием и развитием фетоплацентарной единицы. Согласно данным Л.В. Ковальчука и соавт. (2006), определение в сыворотке крови высоких уровней цитокинов наблюдается при выраженных патологических процессах и свидетельствует о нарушении функционирования цитокиновой сети.

По данным литературы, IL-6 секретируясь трофобластом, способствует успешной имплантации (Ширшев С.В., 2002; Сухих Г.Т., Ванько Л.В, 2003). Активируя супрессорное звено лимфоцитов, может затруднять реализацию эффекторных реакций иммунной системы матери по отношению к плоду (Margni R. et al., 2001; Zenclussen A., 2002). С другой стороны IL-6 является главным медиатором белков острой фазы, активирует коагуляционные реакции, может привести к нарастанию продукции простагландинов и преждевременному развитию родовой деятельности (Тетруашвили Н.К., 2000). Анализируя результаты исследования содержания IL-6, нам удалось установить следующие факты: в подгруппе Iа по сравнению с группой с физиологическим течением беременности выявлено достоверное однонаправленное повышение IL-6, как в сыворотке крови, так и в цервикальной слизи в динамике гестации. Наиболее выраженное увеличение содержания IL-6 отмечено в цервикальной слизи (табл.4).

Таблица 4

Средние значения содержания про- и противовоспалительных


загрузка...