Сиалидазная активность и морфологические изменения опухолевых клеток нейрального и мышечного происхождения (09.02.2009)

Автор: Прошин Сергей Николаевич

Рис. 8. Частота клеток с «хвостатыми» ядрами в клетках клонов метастазов рабдомиосаркомы РА–23 крыс при введении циклофосфана (группа II). Группа I – контроль (изотонический раствор хлористого натрия). N=количество проанализированных клеток. По вертикали – процент клеток с «хвостатыми» ядрами. *Различие достоверно относительно группы I при p<0.05.

Анализируя результаты, можно отметить, что при дозировке 50 мг/кг циклофосфан тормозил образование и рост метастазов. Полученные данные подтверждают результаты предыдущих экспериментов, показавших противоопухолевые свойства циклофосфана, и позволяют предположить, что данный препарат оказывает генотоксическое действие как на первичные опухоли, так и на их метастазы.

3.1.2. Сиалидазная активность в клетках опухолевых клонов рабдомиосаркомы РА–23 крыс, контрастных по метастатическому потенциалу.

В виду изменений способности к метастазированию (метастатического потенциала) клеток опухолевых клонов рабдомиосаркомы РА-23 представлялось важным также ответить на вопрос: сопровождается ли изменение метастатического потенциала изменением биохимических характеристик опухолевых клеток. Лизосомальная сиалидаза и сиалидаза, ассоциированная с плазматической мембраной, являются ферментами, участвующими в гидролизе олигосахаридов и гликосфинголипидов (ганглиозидов), соответственно, модулируя состав гликопротеинов и гликосфинголипидов клеточной мембраны, и изменяя, таким образом, способность опухолевых клеток к метастазированию и инвазии. В связи с этим на активность лизосомальной сиалидазы и сиалидазы, ассоциированной с плазматической мембраной (САПМ), были проанализированы опухолевые клоны, контрастные по способности к метастазированию. На предмет выявления сиалидазной активности были протестированы три клона из контрольной выборки и три клона, извлечённых из лёгких животных, подвергшихся обработке цитостатиком циклофосфаном. Как видно из табл. 1, активность лизосомальной сиалидазы в клонах с низким метастатическим потенциалом варьировала в грубой фракции (фракция I) от 0.903 до 1.297 ед. на мг белка и в среднем составляла 1.100±0.284 ед. на мг белка. Активность лизосомальной сиалидазы в клонах с высокой способностью к метастазированию в грубой фракции (фракция I) варьировала от 0.602 до 0.950 ед. на мг белка и в среднем составила 0.818±0.271 ед. на мг белка, что достоверно не отличалось от среднего показателя, выявленного во фракции I, полученной из клонов с низким метастатическим потенциалом (p>0.05). Дальнейшее исследование обогащённой фракции (фракция II), выделенной из клонов с высоким метастатическим потенциалом, выявило, что средний показатель активности лизосомальной сиалидазы составил 1.48±0.12 ед. на мг белка, тогда как активность лизосомальной сиалидазы, зарегистрированная во фракции II, выделенной из клонов с высоким метастатическим потенциалом, в среднем составляла 2.70±0.29 ед. на мг белка, что значимо отличалось от среднего показателя (фракция II) среди клонов с пониженной способностью к метастазированию (p<0.01). Следует отметить, что активность лизосомальной сиалидазы в мышечной ткани как у крыс, не подвергшихся

Таблица 1

Активность лизосомальной сиалидазы в клетках

опухолевых клонов рабдомиосаркомы РА-23 с высоким

и низким метастатическим потенциалом

Клоны Активность лизосомальной сиалидазы

(в единицах на мг белка)

фракция I фракция II

С высоким

метастатичес-ким

потенциалом

D 1 0.602 1.38

D 2 0.905 1.49

D 3 0.950 1.57

Средние значения

0.818±0.271 1.48±0.12

С низким

метастатичес-ким

потенциалом C 1 0.903 2.81

C 2 1.297 2.44

C 3 1.101 2.86

Средние значения

1.100±0.284 2.70±0.29*

*Различие достоверно относительно среднего показателя

для клонов с высоким и низким метастатическим потенциалом при p<0,01.

воздействию цитостатиков, так и у крыс, которые подверглись воздействию циклофосфана, в среднем, не превышала 0.983±0.142 и 0.979±0.197 ед. на мг белка, соответственно.

3 была выше (1.040±0.187 ед. на мг белка) по сравнению со средним показателем, зарегистрированным для выборки клонов С1, С2 и С3 (0.930±0.167 ед. на мг белка). Несмотря на тенденцию к повышению активности САПМ среди клонов D1, D2 и D3 следует отметить, что достоверных различий между исследованными показателями активности САПМ выявить не удалось (p>0.05). Активность САПМ в мышечной ткани как у крыс, которые не подвергались воздействию цитостатиков, так и у крыс, которые подверглись воздействию циклофосфана, составила 0.901±0.282 и 0.911±0.165 ед. на мг белка, соответственно.

Таблица 2

Активность сиалидазы, ассоциированной с плазматической мембраной (САПМ), в клетках опухолевых клонов рабдомиосаркомы РА-23

с высоким и низким метастатическим потенциалом

Клоны Активность САПМ

(в единицах на мг белка)

С высоким

метастати-ческим

потенциалом D 1 0.96

D 2 1.32

D 3 0.84


загрузка...