МАЛЯРИЯ У ДЕТЕЙ: КЛИНИЧЕСКИЕ И ИММУНОПАТОГЕНЕТИЧЕСКИЕ ОСОБЕННОСТИ, ОПТИМИЗАЦИЯ ЛЕЧЕНИЯ (05.10.2009)

Автор: Ходжаева Нигина Мурадовна

Контингент, материал и методы исследований: Исходя из цели и задач, было проведено динамическое наблюдение и обследование 570 больных трехдневной малярией и 265 больных тропической малярией в возрасте от 5 мес. до 14 лет, находившихся на лечении в Городской и Детской клинических инфекционных больницах г. Душанбе, а также инфекционных отделениях Центральных районных больниц районов А.Джоми и Яван Хатлонской области РТ в период 2000-2006 гг. Кроме того, проведено паразитологическое исследование крови у 900 детей, коренных жителей эндемичных регионов по выявлению бессимптомного паразитоносительства P.vivax и P.falciparum.

Диагноз трехдневной и тропической малярии установлен на основании клинико-эпидемиологических данных и подтверждался обнаружением возбудителей при микроскопии препаратов крови; у 45 больных проведено дополнительное исследование с использованием полимеразной цепной реакции (ПЦР) для дифференциальной генодиагностики рецидива лекарственно-устойчивой falciparum-малярии и реинфекции P. falciparum.

Контроль паразитемии проводили согласно правилам ВОЗ с момента поступления на лечение до последнего дня, когда плазмодии не обнаруживались в периферической крови, а также на 7, 14, 21 и 28 дни с целью исключения рецидива, в связи с возможным наличием резистентности паразита к применяемому противомалярийному препарату.

Метод ПЦР, направленный на выделение ДНК плазмодиев, включал специальные реактивы и оборудование: готовый стандартный набор Extra-Gene (ДНК-технология, Россия), включающий лизис-реагент, сорбент ДНК – Nucleos, промывающий раствор и солевой буфер; 5% суспензию Chelex Resin 100 (Biorad) и раствор PBS. Выделение ДНК производили также из препаратов «толстая капля», ранее окрашенных по Романовскому-Гимзе.

Все использованные нами методические приемы и объем проведенных лабораторных исследований представлены в таблице 1.

Таблица 1.

Направления, методы и объем исследований

№ Направление

исследования Методы исследования Объем работ

1. Клинико-лабораторные исследования. Анкетирование пациентов.

Комплексное клиническое обследование больных в динамике болезни.

Мониторинг клинико-биохимических и инструментальных (ЭКГ, УЗИ) показателей.

Оценка клинико-иммунологической эффективности иммуномодулятора «АФГ/Тамерит» в лечении трехдневной и тропической малярии.

Оценка терапевтической эффективности различных противомалярийных препаратов при тропической малярии. 570 чел. vivax-мал.; 265 чел. falciparum- малярией

56/280 чел/проб

224 чел.

2. Микроскопическая и молекулярная диагностика малярии. Выявление возбудителя методом толстой капли и тонкого мазка и определение уровня паразитемии.

Качественное определение генетического материала паразита (плазма) методом ПЦР. 570 чел.

265 чел.

45 чел.

3. Исследования клеточного и гуморального иммунитета;

ЦИК и С3 – комплемента. Определение содержания в сыворотке крови Т-лимф., CD4+, CD8+, В-лимф. – с помощью коммерческих наборов и моноклональных антител фирмы «ORTON» (США) на цитометрическом счетчике (FACSVAN).

Количество IgA, Ig M, IgG, и С3 в сыворотке крови методом иммунорадиальной диффузии в геле по Манчини и ИФА;

ЦИК – по Hashkova (1978). 126/318 чел/проб

124/307 чел/проб

4. Исследования факторов неспецифической резистентности и микробицидной активности нейтрофилов. 11. Определение фагоцитарной активности нейтрофилов (% фагоцитоза, ФИ, ФП) по методу В.М. Берман и Е.М. Славской; активность НСТ-теста – по методу J.Stuart et.al (1975) в модификации Б.С.Нагоева (1983) с полуколичественным учетом внутриклеточных компонентов по L.Kaplow;

12. Содержание миелопероксидазы – по A.Sato (1925), гликогена – по А.Л. Шабадашу (1947), кислой фосфатазы – с помощью реакции азотосочетания по A.Goldberg и T.Barca (1962) в модификации В.И. Дудецкого (1970), липидов – по методу Г.И. Раскина и Л.Б. Левинсона (1957). 45/95 чел/проб

68/122 чел/проб

чел/проб;

чел/проб

5. Характеристика цитокинового статуса. 13. Определение содержания TNF-?, IL-1?, IL-2, IL-4, IL-6 в сыворотке крови методом конкурентного и сэндвич-ИФА (ELISA) с использованием коммерческих тест-систем фирмы «ProCon» Санкт-Петербург; IFN-? – также методом ИФА с использованием тест-системы «Biosourse» (США). 75/206 чел/проб

74/203 чел/проб

6. Характеристика показателей

ПОЛ/АОЗ. 14. Определение содержания в сыворотке крови малонового диальдегида по методу И.Д.Стальной и Т.Г.Горишвили (1977), активности каталазы – по М.И.Королюк, А.И.Ивановой, И.Г. Майоровой (1988).

Оценка кислородзависимых механизмов бактерицидности фагоцитов в НСТ-тесте. 51/147 чел/проб;

51/147 чел/проб.

45 проб

7. Статистическая обработка материала. 16. Математическая обработка проводилась методами описательной, параметрической и непараметрической статистики с использованием программы «Biostat-6». Все показатели.

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА ОБСЛЕДОВАННЫХ БОЛЬНЫХ

Распределение больных по возрастным группам при трехдневной малярии было следующим: детей до 1 года – 56 (9,8%), с 1 до 3 лет – 108 (18,9%), с 3 до 7 лет – 120 (21,1%), с 7 до 11 лет – 134 (23,5%) и с 11 до 14 лет 152 (26,7%).


загрузка...