Сигнальные пути ядерного транскрипционного фактора каппа В (NF-?B) в чувствительных нейронах (02.08.2010)

Автор: Гущина Светлана Валентиновна

Гущина Светлана Валентиновна

Сигнальные пути ядерного транскрипционного фактора каппа В (NF-?B) в чувствительных нейронах

03.03.04. – клеточная биология, цитология, гистология

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени

доктора биологических наук

Саранск – 2010

Работа выполнена в Государственном образовательном учреждении высшего профессионального образования «Российский государственный медицинский университет Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию» и в Центре нейронаук Университета Лондона

Научные консультанты:

доктор медицинских наук

академик РАМН, профессор Волкова Ольга Васильевна

доктор биологических наук,

профессор Кругляков Павел Павлович

Официальные оппоненты:

доктор биологических наук,

профессор Ермолин Игорь Леонидович

доктор медицинских наук,

профессор Челышев Юрий Александрович

доктор медицинских наук,

профессор Швалев Вадим Николаевич

Ведущая организация: Научный центр неврологии РАМН

Защита состоится «_15_» октября 2010 года в 10.00 часов на заседании диссертационного совета Д 212.117.01 при ГОУ ВПО «Мордовский государственный университет имени Н.П. Огарева» (430000, Республика Мордовия, г. Саранск, ул. Большевистская, 68).

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ГОУ ВПО «Мордовский государственный университет имени Н.П. Огарева» (430000, Республика Мордовия, г. Саранск, ул. Большевистская, 68).

Автореферат разослан «_______» ________________ 2010 года

Ученый секретарь диссертационного совета

доктор биологических наук, профессор В.П. Балашов

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность проблемы. Раскрытие молекулярных механизмов регуляции нейродегенеративных/нейрорегенеративных процессов при травмах головного и спинного мозга, а также различных повреждениях периферических нервов – одна из важнейших проблем современных нейронаук, решение которой связано с разработкой новейших подходов к лечению этих тяжелых состояний. Одним из важных направлений исследований в этой области остается изучение клеточных и молекулярных процессов, лежащих в основе регенерации периферического нерва, понимание которых поможет решить фундаментальные проблемы регенерации нервной ткани.

, как и активация ядерного транскрипционного фактора NF-?B.

Многочисленные молекулярные и клеточные изменения в спинномозговых ганглиях после повреждения периферического нерва изучены достаточно глубоко (Baldwin, 1996; Koliatsos, Price, et al., 1996). Особое внимание в настоящее время уделяется исследованию процессов, происходящих в клетках на молекулярном уровне и включающих индукцию транскрипционных факторов, регулирующих последующую активацию и транскрипцию специфических генов регенерации.

Было обнаружено, что стимулирующим фактором при регенерации периферического нерва может служить развитие воспалительной реакции вокруг перикарионов нейронов спинномозговых узлов (Lu, Richardson, 1991), молекулярные механизмы которой связаны в том числе с индукцией цитокинов, таких, как интерлейкин-6 (Murphy et al., 1999), фактор некроза опухоли альфа (TNF-?) (Schafers et al., 2003) и др. Ядерный транскрипционный фактор NF-?B является классическим мессенджером, регулирующим каскады реакций, связанные с различными цитокинами и клеточной гибелью.

. Однако сложность этого фактора обусловливает противоречивость заключений о сигнальных путях NF-?B в поврежденных нейронах.

В связи с этим возникла необходимость генерировать трансгенную линию мышей, в которых активность NF-?B ингибирована исключительно в зрелых нейронах, для дальнейшего изучения функциональной роли нейрональной NF-?B.

Цели исследования. Цель настоящей работы – изучить биологическую роль ядерного транскрипционного фактора NF-?B и молекулярных механизмов, регулирующих его активность в зрелых нейронах спинальных ганглиев после травмы периферического нерва.

Задачи исследования. Для достижения поставленной цели необходимо было решить ряд конкретных задач.

1. Выяснить, повышается ли посттравматическая экспрессия NF-?B-зависимых генов MCP-1 (monosyte chemoattractant protein-1) и I?B? (inhibitor of NF-?B) в зрелых нейронах спинальных ганглиев in vivo и при стимуляции культуры чувствительных нейронов провоспалительными цитокинами (TNF-?) in vitrо.

2. Провести анализ ДНК-связывающей активности NF-?B в посттравматических нейронах in vivo и при стимуляции культуры чувствительных нейронов TNF-? in vitro.

3. Создать трансгенную линию мышей с модифицированной активностью транскрипционного фактора NF-?B in vivo специфически в зрелых нейронах и провести молекулярно-генетический анализ полученных линий.

4. Изучить на трансгенной модели животных биологический эффект ингибирования нейрональной активности NF-?B, оказываемый на основные физиологические параметры и посттравматическую выживаемость зрелых чувствительных нейронов.

5. Выявить транскрипционную активность NF-?B в зрелых чувствительных нейронах in vivo и in vitro с использованием трансгенной линии репортерных мышей NF-?B/LacZ.


загрузка...