Морфогенетическая активность дерморфина и его аналогов в различных клеточных популяциях (02.08.2010)

Автор: Флейшман Марина Юрьевна

Наряду с общими показателями количества сформировавшихся личинок, важным параметром является скорость выклева. Обеспечение «дружного» выклева является важной проблемой рыбоводства.

Воздействие седатина значительно увеличивало скорость выклева, особенно, в первые 24 часа (рис. 3).

Рис. 3. Влияние обработки оплодотворенной икры различными концентрациями седатина на скорость выклева предличинок осетра амурского.

Максимальная выживаемость мальков через 60 дней после обработки седатином имела место при воздействии пептидом 0,1 мг/л. Это позволило нам остановиться в последущих исследованиях на дозе 0,1 мг/л.

Наблюдение за общим состоянием, поведенческими реакциями, а также анализ соматометрических показателей мальков экспериментальных групп осуществляли в течение 2 месяцев (60 дней) с момента выклева до периода помещения особей в естественную среду обитания.

Однократное воздействие седатином в дозе 0,1 мг/л на оплодотворенную икру осетра амурского индуцировало увеличение массо-ростовых показателей подопытных особей по сравнению с контрольными параметрами (рис. 4).

Рис. 4. Влияние однократной обработки оплодотворенной икры осетра амурского раствором седатина на динамику соматометрических показателей мальков в постнатальном периоде (а – длина тела; б – масса тела; * р<0,05).

Результаты исследования сравнения эффектов безаргининового аналога седатина и седатина свидетельствуют в пользу ускоренного развития мальков, подвергнутых воздействию аргининсодержащего аналога дерморфина (табл. 9).

Таблица 9

Влияние обработки оплодотворенной икры синтетическими аналогами

дерморфина (седатин и седатин без аргинина) в дозе 100 мкг/л

на соматометрические показатели 60-суточных мальков осетра амурского

контроль седатин седатин без аргинина

масса (г) 6,663 + 0,807 9,830 + 1,044 *

р=0,038 7,873 + 0,859

длина (см) 11,46 + 0,53 12,98 + 0,48 *

р=0,048 12,10 + 0,39

по Фултону 0,431 + 0,008 0,442 + 0,013

0,436 + 0,013

Примечание: * р<0,05

Таким образом, обработка икры осетровых раствором седатина не вызывает негативных отклонений в последующие 2 месяца развития рыб. Более того, по данным соматометрии, имеют место признаки ускоренного развития подопытных мальков. Полученные результаты, судя по стабильности индекса упитанности по Фултону, свидетельствуют в пользу гармоничности процесса роста и развития мальков. Изменение структуры молекулы пептида удаление аминокислотного остатка аргинина (эксперимент с безаргининовым аналогом седатина), приводит к нивелированию эффекта седатина в отношении соматометрических показателей.

Активность процессов свободнорадикального окисления определяли в образцах оплодотворенной икры через 18 часов после проведения инкубации с пептидами. Установлено, что при воздействии седатина на инкубируемую икру осетра амурского активируются системы антиоксидантной антирадикальной защиты: в сравнении с контролем величина S2инд статистически значимо снизилась в 1,6 раза. Наблюдается увеличение перекисной резистентности (Н2 снизилась в 2,1 раза) и замедление процесса генерации перекисных радикалов (S1инд снизилась в 1,5 раза).

Анализ показателей хемилюминесценции (табл. 10) гомогенатов сердца и печени 60-суточных мальков, подвергнутых в антенатальном периоде развития однократной обработке седатином, продемонстрировал, что воздействие пептида увеличило буферную емкость антиоксидантной и антирадикальной системы защиты, а также перекисную резистентность в исследуемых тканях. Об этом свидетельствуют статистически значимое снижение амплитуды H2 (в 1,26 и 1,36 раза) и величины S2инд (в 1,31 и в 1,43 раза), соответственно. Выявленные изменения активности защитных систем не влияли на редокс-потенциал исследуемых тканей: величины S sp не имели достоверных отличий от контрольных уровней.

Таблица 10

Влияние однократной обработки оплодотворенной икры осетра амурского

седатином на показатели хемилюминесценции (в отн. ед.)

гомогенатов сердца и печени 60-суточных мальков

Sсп Инд. ХМЛ (люминол-Н2О2)

H2 S2инд

контроль

10,37(0,12 9,08(0,18 12,71(0,29

седатин

11,08(0,18 7,69(0,21* 9,74(0,30*

контроль

0,41(0,03 5,74(0,18 8,59(0,26

седатин

0,37(0,03 4,50(0,12* 6,01(0,19*

Примечание: * p<0.05

Представляет интерес тот факт, что изменения свободнорадикального статуса (повышение уровня антиоксидантной защиты), сохранились в тканях сердца и печени у 60-суточных мальков (таблица 10). Таким образом, действие седатина носит долгосрочный характер. Одним их возможных объяснений этому может быть эффект эмбрионального импринтинга, опосредуемого свободнорадикальными механизмами. Подобные изменения могут быть оценены как позитивные, поскольку способствуют повышению адаптируемости особей к негативным воздействиям внешней среды.

Анализ состояния ЯО осуществляли в ткани печени и миокарда сорокапятисуточных особей. Выбранный возраст определялся тем, что к этому времени у мальков полностью сформированы органы. С показателями контрольной группы сопоставляли показатели группы мальков, подвергнутых в зародышевом периоде воздействию седатина и его безаргининового аналога в концентрациях 0,1 мг/л. В наших исследованиях получены результаты, свидетельствующие о достоверном увеличении количества ЯО у подопытных особей группы «седатин», по сравнению с контрольными. Среднее число ядрышек в ядрах гепатоцитов в контрольной группе мальков составило 3,22 ± 0,15, в подопытной – 5,43 ± 0,30. У мальков, подвергнутых на ранних этапах развития воздействию «безаргининового» аналога седатина, изменения носили недостоверный характер. При анализе гистологических препаратов сердца подопытных особей молоди осетра амурского среднее число ядрышек в ядрах клеток миокарда в контрольной группе мальков составило 3,14±0,14. В подопытной группе количество ядрышек на ядро в среднем составило 5,03±0,29 (р<0,05).


загрузка...