Оксидативный стресс и система оксида азота при постнатальной адаптации и развитии заболеваний у сельскохозяйственных животных (02.08.2010)

Автор: Близнецова Галина Николаевна

Введение ФБ-26 в дозе 20 мг/кг не вызывало статистически достоверных изменений показателей, характеризующих активности СОД и каталазы. Повышение дозы ФБ-26 до 100 мг/кг приводило к снижению активности данных энзимов на 29,8 и 13,7%, соответственно, по сравнению с показателями у животных 2-ой группы

Можно было бы отнести установленные изменения к негативным, однако исследования, проведенные по изучению интенсивности образования супероксиданиона в печени подопытных животных, показали, что применение ФБ-26 в дозе 20 мг/кг ограничивало спонтанную продукцию супероксиданиона на 52,6%, а НАДН- и НАДФН-зависимую – на 64,6% и 62,5%, соответственно. Увеличение дозы ФБ-26 усилило его эффективность. Спонтанная продукция О2( снижалась до 18,6%, а НАДФН-стимулированная до 19,6% от показателей, характеризующих данные процессы у иммобилизированных животных, которым вводили только физраствор. Это является доказательством достаточно выраженных антирадикальных свойств ФБ-26.

Установлено также, что профилактическое применение ФБ-26 до иммобилизации активирует систему оксида азота (табл. 17).

Таблица 17

Влияние ФБ-26 на состояние NO-ергической стресс-лимитирующей системы у крыс при эмоционально-болевом стрессе

Группы животных NOx, мкМ/л RSNO, нМ/л

1. Интактные 44,6±3,73 1572,0±58,04

2. Контроль (иммобилизация) 93,5±8,37* 2240,0±73,8*

3. Иммобилизация + 20 мг/кг ФБ-26 160,2±5,45*? 2312,5±68,8*

4. Иммобилизация + 100 мг/кг ФБ-26 186,6±6,86*? 2450,0±125,8*

Примечание: *– P1–2,3,4 < 0,05; ? – P2-3,4,<0,05

Установлено, что в дозах 20 мг/кг и 100 мг/кг применение ФБ-26 статистически достоверно повышает содержание стабильных метаболитов оксида азота в 1,7 и 2 раза, соответственно, по сравнению с их концентрацией в плазме крови животных 2-ой группы. При этом достоверных различий в содержании S-нитрозотиолов у крыс 2-ой, 3-ей и 4-ой групп не установлено, что с одной стороны свидетельствует о повышении концентрации NO( за счет нитратной группировки изучаемого соединения, с другой – о сохранении пула нитрозотиолов, способных потенцировать эффекты оксида азота.

Таким образом, с учетом основных критериев оценки острой стресс-реакции (изменение общей массы тела, массы надпочечников, тимуса и селезенки, интенсивность язвообразования), установлено, что соединение ФБ-26 обладает выраженными стресс-протективными, антирадикальными и антиоксидантными свойствами. Его применение препятствует избыточной активации ПОЛ в ответ на стресс-воздействие, снижает негативные изменения в ферментативном звене антиоксидантной системы организма и активирует NO-ергическую стресс-лимитирующую систему оксида азота.

3.7.6. Влияние соединения ФБ-26 на оксидантно-антиоксидантный

статус и систему оксида азота при токсическом повреждении печени

тетрахлорметаном

Установлено, что применение ФБ-26 оказывает достаточно выраженное гепатопротекторное действие, о чем свидетельствует снижение активности маркерных ферментов цитолиза клеток печени – аспартат- (АсАТ) и аланинаминотрансферазы (АлАТ) в сыворотке крови. Наиболее эффективным было профилактическое применение ФБ-26 за 12 часов до первой инъекции тетрахлорметана, которое снижало активность АлАТ и АсАТ в 2,2 и 2,1 раза, соответственно, по сравнению с их активностью у животных с токсическим гепатитом, вызванным введением гепатотоксина. У животных, которым соединение вводили за 1 час до второй инъекции тетрахлорметана, динамика активности маркерных ферментов цитолиза была аналогичной, но менее выраженной.

Применение ФБ-26 (3-я и 4-я группы) при токсическом гепатите снижало образование супероксиданиона в печени (табл. 18).

Максимальное снижение интенсивности образования супероксид-аниона было характерно для животных 4-ой группы: спонтанная генерация О2( уменьшалась на 27,7%, НАДН-стимулированная - на 37,1%, НАДФН-стимулированная - на 18,7%, по сравнению с животными, которым вводили только тетрахлорметан.

Ограничивающее влияние ФБ-26, оказываемое на интенсивность образования активных форм кислорода, по всей вероятности, и обусловило его корригирующее действие на интенсивность накопления в крови начальных и вторичных продуктов пероксидного окисления липидов.

Исходя из полученных данных, можно утверждать, что для ограничения процессов ПОЛ при токсическом повреждении печени более предпочтительно применение ФБ-26 за 1 час до повторной инъекции гепатотоксина (4-я группа), снижавшее уровень диеновых конъюгатов на 33,6%, кетодиенов – на 36,0% и малонового диальдегида на 37,2%, по сравнению с показателями у животных с CCl4-интоксикацией.

Таблица 18

Влияние применения ФБ-26 на продукцию О2( в печени крыс

при токсическом повреждении печени

животных Продукция O2(, нмоль/г(сек

Спонтанная Стимулированная

НАДН НАДФН

1. Интактные 0,50(0,021 6,5(0,08 7,9(0,06

Токсическое повреждение печени

2. Контроль 0,83(0,024* 15,1(0,51* 22,5(0,10*

3. 100 мг/кг ФБ-26 за 12 часов 0,67(0,040*? 10,8(0,28*? 17,1(0,41*?

4. 100 мг/кг ФБ-26 за 1 час 0,60(0,032*? 9,5(0,52*? 18,3(0,72*?

Примечание: *–P1–2,3,4 < 0,05; ? – P2-3,4 <0,05

Изучение состояния ферментативного звена АОС показало, что независимо от схемы введения ФБ-26, его применение повышало активность каталазы на 13,5-17,9%, и СОД – на 15,2-19,7 и практически не влияло на состояние глутатионового звена АОС в крови животных с токсическим повреждением печени. Следовательно, это соединение не только ограничивает пероксидацию липидов при токсическом повреждении печени, но и способствует сохранению эффективного контроля этих процессов со стороны антиоксидантной системы, предотвращая протекание более глубоких стадий свободнорадикального окисления.

введение тетрахлорметана вызывало значительное увеличение продукции NO(, о чем свидетельствовало более чем 3-кратное повышение содержания суммы NO2?+NO3? в плазме крови. Использование ФБ-26 при токсическом повреждении печени стимулировало дальнейшее накопление NO( в биофазе.

Рис. 15. Cодержание NO2?+NO3? и RSNO в плазме крови крыс при повреждении печени CCl4

(в % к отрицательному контролю)

Так, концентрация суммы стабильных метаболитов оксида азота возрастала в плазме крови животных 3-ей группы на 47,3%, 4-ой группы – на 68,8% (рис. 15). Максимальный уровень S-нитрозо-тиолов был зафиксирован у животных, получавших соединение за 12 часов до инъекции токсина, – их концентрация составила 3940 нМ/мл, хотя статистически достоверных различий между данными показателями, характеризующими накопление RSNO для животных 2-ой и 3-ей группы, отмечено не было.

Таким образом, проведенные исследования показали наличие гепатопротекторных свойств у ФБ-26. Механизм коррекции цитолитического синдрома при токсическом повреждении печени, по-видимому, обусловлен рядом факторов: во-первых, применение ФБ-26 достаточно эффективно снижает субклеточную продукцию супероксидного радикала, а во-вторых – стимулирует повышение концентрации NO(, вовлеченного в ограничение повреждающих эффектов, как на центральном, так и на периферическом уровне.

3.7.7. Влияние соединения ФБ-26 на оксидантно-антиоксидантный статус и систему оксида азота при ожоговой травме


загрузка...